Actividad enzimática del suelo: deshidrogenasa, fosfatasas y beta-glucosidasa

Fundamento

Cada enzima se mide incubando el suelo con un sustrato artificial que al ser hidrolizado libera un producto coloreado. La deshidrogenasa reduce una sal de tetrazolio a formazán, rojo; las fosfatasas y la beta-glucosidasa liberan p-nitrofenol, amarillo en medio alcalino. Después de un tiempo y una temperatura fijos se detiene la reacción, se filtra y se lee la absorbancia contra una curva del producto.

Matriz (en qué muestra)

Suelo agrícola; suelo contaminado

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Estufa de incubación a 37 °C; espectrofotómetro visible; agitador; centrífuga.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Cloruro de trifeniltetrazolio; p-nitrofenil fosfato y p-nitrofenil glucósido; buffers MUB; cloruro de calcio; hidróxido de sodio; patrones de formazán y de p-nitrofenol.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos de incubación; papel de filtro; celdas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Sustratos enzimáticos, que son caros y se degradan.

Unidad

µg de producto por gramo y por hora · µg TPF/g·h de deshidrogenasa · µg p-nitrofenol/g·h de fosfatasa

Rango de referencia

Los valores absolutos dependen del método: el indicador vale para comparar tratamientos medidos en la misma tanda, no contra tablas ajenas

Norma que lo exige

Ley 22.428 de fomento a la conservación de los suelos y regímenes provinciales de conservación y de buenas prácticas agrícolas; Ley 24.051 de residuos peligrosos y su Decreto 831/93, Anexo II, Tabla 9, niveles guía de calidad de suelo para el seguimiento de suelos en remediaciónnorma internacional

Norma que describe la técnica

ISO 23753-1 y 23753-2 (deshidrogenasa); métodos de Tabatabai para fosfatasas y glucosidasa; SSSA Methods of Soil Analysis, parte 2norma internacional

Edición y vigencia de la norma

ISO 23753-1:2019, vigente

Volumen de muestra

50 a 100 g de suelo en fresco, tamizado en húmedo a 2 mm

Conservación y transporte

Se trabaja con suelo fresco y refrigerado: el secado al aire baja la actividad de la deshidrogenasa a una fracción de la original y hace que los resultados no se puedan comparar con los de un laboratorio que trabaja en fresco. Cada tanda lleva su control sin sustrato y su control sin suelo, porque varios suelos tienen color propio que se suma a la lectura. Todo se compara dentro de la misma tanda.

Límite de detección típico

1 µg de producto por gramo y por hora

Incertidumbre típica

±15 a 25%; la comparación entre laboratorios es poco confiable y por eso conviene incluir siempre un suelo de referencia

Área

Suelos y sustratos; Microbiología; Química analítica

Fecha de última actualización: 8/9/2026