Calibración gravimétrica de pipetas de pistón y dispensadores según ISO 8655

Fundamento

Se dispensa agua destilada con la pipeta sobre un recipiente en una balanza analítica o una microbalanza, diez veces en cada uno de los volúmenes de ensayo (el nominal, el 50 % y el 10 % del rango en pipetas variables), y cada masa se convierte a volumen con el factor Z, que tiene en cuenta la densidad del agua a la temperatura medida, la densidad del aire y el empuje sobre las pesas de la balanza. El error sistemático es la diferencia entre el volumen medio y el nominal, y el error aleatorio es la desviación estándar de las diez pesadas, y los dos se comparan con los límites de la norma para cada tipo y volumen de pipeta. La evaporación durante la pesada se controla con una trampa de humedad en la balanza o con una corrección por blanco, que en volúmenes de microlitros importa tanto como el propio error. El operador, la técnica de pipeteo, la punta y el equilibrio térmico de la pipeta, el agua y el ambiente se fijan antes de empezar, porque un cambio de un grado entre la pipeta y el agua cambia el volumen aspirado. Los métodos fotométricos, con una solución coloreada y un espectrofotómetro, son la alternativa para pipetas multicanal y para volúmenes muy chicos. Se informa el error de cada volumen con su incertidumbre y se ajusta la pipeta si está fuera de tolerancia, repitiendo la calibración después.

Matriz (en qué muestra)

Pipetas de pistón de volumen fijo y variable; pipetas multicanal; dispensadores; buretas de pistón; diluidores; puntas

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Balanza analítica o microbalanza con resolución de 0,01 mg para volúmenes de microlitros y de 0,1 mg para mililitros, con trampa de evaporación; termómetro calibrado para el agua y el aire; barómetro; higrómetro; recipientes de pesada; para el método fotométrico, espectrofotómetro y soluciones de referencia.

Proveedores de Balanzas y pesaje · Espectrofotometría UV-Vis.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Agua destilada o desionizada de grado 3 según ISO 3696; para el método fotométrico, soluciones de colorante certificadas.

Proveedores de Filtración y purificación de agua.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Puntas del fabricante o compatibles verificadas; recipientes de pesada de cuello estrecho; planilla de cálculo del factor Z.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Puntas; agua; recipientes.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Unidad

m³ · µL y mL · % de error sistemático · % de error aleatorio (coeficiente de variación) · m3

Rango de referencia

Pipeta de 100 a 1.000 µL: error sistemático máximo del 0,8 % y aleatorio del 0,3 % a 1.000 µL según ISO 8655-2; pipeta de 10 µL: 1,2 % y 0,8 %. La calibración se repite cada 6 a 12 meses según el uso

Norma que lo exige

ISO/IEC 17025 e ISO 15189, que exigen la calibración con trazabilidad de los equipos que afectan a los resultados, y los organismos de acreditación (OAA) que las verifican; las buenas prácticas de fabricación de la ANMAT (Disposición 3827/2018) y las buenas prácticas de laboratorio; los programas de aseguramiento de la calidad de los laboratorios clínicosargentina e internacional

Norma que describe la técnica

ISO 8655-1 a 8655-9 para los aparatos volumétricos de pistón, sus requisitos, los límites de error y el método gravimétrico (parte 6) y fotométrico (parte 7); ISO 4787 para el material volumétrico de vidrio; la guía EURAMET cg-19 para la calibración de instrumentos de volumen; ISO 3696 para el agua de laboratorioargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

ISO 8655-1:2022 y ISO 8655-6:2022

Volumen de muestra

No destructivo. Diez determinaciones por volumen de ensayo, en tres volúmenes para pipetas variables; el servicio incluye la limpieza, la verificación y el ajuste

Conservación y transporte

La pipeta, las puntas, el agua y la balanza tienen que estar al menos dos horas a la misma temperatura, entre 15 y 30 grados y con humedad relativa mayor al 50 % para limitar la evaporación; una pipeta que viene de un transporte en frío mide otro volumen. Se calibra con las puntas que se usan de verdad, porque cambiar de marca de punta cambia el volumen. Las pipetas que dispensan reactivos agresivos se limpian y se revisan los sellos antes. El certificado tiene que decir los volúmenes ensayados, el error y la incertidumbre de cada uno, y si se ajustó.

Límite de detección típico

0,01 µL de resolución con microbalanza

Incertidumbre típica

Del 0,2 al 0,5 % del volumen en pipetas de microlitros y del 0,1 % en mililitros, dominada por la evaporación y la repetibilidad

Área

Metrología y calibración; Química analítica; Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 9/9/2026

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