Neopestalotiopsis clavispora en plantines de frutilla por aislamiento e identificación

Fundamento

Neopestalotiopsis clavispora es un hongo que en los últimos años pasó de considerarse un patógeno secundario o de debilidad a ser un problema serio del cultivo de frutilla, con manchas foliares de centro claro y borde oscuro, lesiones en pecíolo y corona, y pudriciones que pueden matar la planta. Su incorporación a la norma argentina vino de un pedido concreto de la Dirección de Producción Vegetal del Ministerio de Producción de Corrientes, que solicitó monitorear los plantines para descartar su presencia junto con la del ácaro del ciclamen. La vía de diseminación que importa al vivero es el propio plantín: el hongo viaja en tejido asintomático y se expresa después, en la quinta del comprador. El diagnóstico parte del aislamiento: se toman fragmentos del borde de la lesión, donde el hongo está activo, se desinfectan superficialmente para eliminar la flora acompañante, se siembran en medio de cultivo y se incuban. La identificación se hace sobre las estructuras reproductivas, en particular sobre los conidios, que en este género son fusiformes, con varias células, con las centrales coloreadas y apéndices en los extremos; el número, el color de las células medias y la disposición de los apéndices son los caracteres que separan el género y la especie. Cuando la morfología no alcanza, se confirma por secuenciación de regiones marcadoras.

Analito (qué se busca)

Neopestalotiopsis clavispora

Matriz (en qué muestra)

Plantines de frutilla de clase fiscalizada y los viveros que les dan origen, incluidos los destinados a madre de cultivo para fruta y a exportación

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Campana de flujo laminar; estufa de cultivo con control de temperatura y fotoperíodo; microscopio óptico con cámara; lupa estereoscópica; autoclave; para la confirmación molecular, termociclador y servicio de secuenciación.

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Reactivos¿Dónde lo compro?

Medios de cultivo; hipoclorito o alcohol para la desinfección superficial; agua estéril; colorantes de montaje; reactivos de extracción de ADN y amplificación si se confirma por secuenciación.

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Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Placas de Petri; portaobjetos y cubreobjetos; bisturí y pinzas; planilla con la descripción y la ubicación de las lesiones y las fotografías de los conidios medidos.

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Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios de cultivo; placas; portaobjetos; reactivos.

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Unidad

Ninguna · presencia o ausencia en el lote · porcentaje de plantas con aislamiento positivo

Rango de referencia

La tolerancia la fija el Anexo V de la Resolución INASE 166/2021. Ojo: el hongo viaja en tejido sin síntoma visible, de modo que un lote de aspecto sano puede estar infectado y la inspección visual no alcanza; y la identificación por morfología de conidios tiene un límite, porque el género incluye especies muy parecidas, así que los casos dudosos se confirman por secuenciación. El análisis sólo vale si lo hace un laboratorio habilitado por el INASE: la habilitación técnica está reglada por la Resolución INASE 201/2022, y el laboratorio tiene que estar inscripto en el Registro Nacional de Comercio y Fiscalización de Semillas

Norma que lo exige

La Resolución INASE 166/2021, que aprobó las Normas para la Fiscalización de Plantines de Frutilla y derogó la Resolución INASE 304/2010; la Ley 20.247 y su Decreto 2.183/91. El incumplimiento da lugar al rechazo del lote inscripto para fiscalizar o a las sanciones del Capítulo VII de la Ley 20.247. La detección de este hongo se incorporó a pedido de la Dirección de Producción Vegetal del Ministerio de Producción de Corrientes, junto con el monitoreo del ácaro del ciclamennorma argentina

Norma que describe la técnica

Las Normas para la Fiscalización de Plantines de Frutilla, Anexo I de la Resolución INASE 166/2021, y las tolerancias de su Anexo V; los protocolos de análisis de hongos y oomycetes del laboratorio habilitadonorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Resolución INASE 166/2021 vigente

Volumen de muestra

Plantas o fragmentos de hoja, pecíolo y corona del lote, según el tamaño de muestra que fija la norma

Conservación y transporte

Las plantas se envían enteras o en fragmentos, en bolsa de papel dentro de una bolsa plástica para que no se forme condensación, refrigeradas de 4 a 8 grados y procesadas dentro de los pocos días. Una muestra que viajó mojada se cubre de hongos saprófitos que invaden el medio de cultivo y hacen fracasar el aislamiento.

Límite de detección típico

No corresponde: el resultado es el aislamiento, positivo o negativo, sobre el número de fragmentos sembrados

Incertidumbre típica

El rendimiento del aislamiento depende de la desinfección superficial y del estado de la muestra; una muestra con flora saprófita abundante da falsos negativos

Área

Agronomía; Microbiología

Fecha de última actualización: 4/10/2026

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