Recuento de rizobios por el método del número más probable en planta y por siembra en placa

Fundamento

En el recuento en planta se siembran diluciones seriadas del inoculante o del suelo sobre plántulas creciendo en medio estéril sin nitrógeno; a las tres o cuatro semanas se observa qué diluciones produjeron nódulos, y con las tablas del número más probable se estima la población infectiva. En paralelo, la siembra en placa sobre agar extracto de levadura y manitol con rojo congo da el recuento de unidades formadoras de colonia, más rápido pero sin garantizar que sean infectivas.

Analito (qué se mide)

Rizobios viables e infectivos

Matriz (en qué muestra)

Inoculantes comerciales; semilla inoculada; suelo

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cámara de cría con luz y temperatura controladas; cabina de flujo laminar; estufa a 28 °C; autoclave; lupa.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Agar extracto de levadura y manitol con rojo congo; solución nutritiva de Fahraeus sin nitrógeno; hipoclorito y alcohol para desinfectar semillas; agua peptonada.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos de cultivo con soporte; placas de Petri; semillas de la especie hospedante; pipetas estériles.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios; semillas; material descartable.

Unidad

UFC por gramo o por mililitro de inoculante · Rizobios por semilla · número más probable por gramo de suelo

Rango de referencia

La exigencia habitual para soja es del orden de 10⁵ rizobios viables por semilla al momento de la siembra

Norma que lo exige

Resoluciones del SENASA sobre registro y control de calidad de inoculantes para uso agrícola, que fijan el número mínimo de bacterias viables por semilla y por dosisargentina e internacional

Norma que describe la técnica

Manual de la FAO sobre inoculantes de leguminosas; ISO 4833 como referencia general de recuento en placa; protocolos de la Red de Control de Calidad de Inoculantes (REDCAI) de la Asociación Argentina de Microbiologíaargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

Protocolos REDCAI vigentes; manual de la FAO sobre inoculantes

Volumen de muestra

Un envase cerrado y sin abrir del inoculante, o 100 g de suelo en fresco; para semilla inoculada, 100 semillas tomadas de la tolva

Conservación y transporte

El inoculante se transporta refrigerado entre 4 y 10 °C y nunca al sol: una caja en la camioneta a 40 °C mata la población en horas y el análisis mide el transporte, no el producto. Se analiza lo antes posible y siempre antes de la fecha de vencimiento. Para semilla inoculada el tiempo importa todavía más, porque el curasemillas y la deshidratación reducen la población día a día: se analiza dentro de las 24 horas.

Límite de detección típico

10 UFC por gramo con las diluciones habituales

Incertidumbre típica

El número más probable tiene intervalos de confianza amplios, de un factor de 2 a 3: se informa con su intervalo

Área

Suelos y sustratos; Microbiología; Agronomía

Fecha de última actualización: 8/9/2026