Viroide de la cachexia-xiloporosis en material de propagación cítrico por sPAGE e hibridación molecular

Fundamento

La cachexia, también llamada xiloporosis, la causa una variante del viroide del enanismo del lúpulo que afecta a los cítricos. Como todo viroide es una molécula de ARN circular sin cápside, de modo que no hay proteína que un anticuerpo reconozca y la detección tiene que ir al ácido nucleico. Su característica distintiva es la selectividad por hospedante: el mandarino y sus híbridos, el tangelo y la lima dulce son sensibles y muestran picaduras y acanaladuras en la madera bajo la corteza, con goma acumulada, debilitamiento de la unión del injerto y decaimiento del árbol; la naranja dulce y el pomelo lo alojan sin síntomas. Esa combinación es la que lo vuelve un problema de vivero: una planta madre de naranjo perfectamente sana puede ser la fuente de yemas que arruinen una plantación entera de mandarinas. Las normas del programa fijan las mismas dos técnicas que para la exocortis. El sPAGE separa el viroide del ARN de la planta aprovechando su migración anómala en la segunda corrida desnaturalizante; la hibridación molecular con sonda marcada específica lo detecta sobre membrana con mayor sensibilidad. Conviene aclarar que el síntoma en la madera tarda años en aparecer, así que en la planta de vivero la única información disponible es la del laboratorio.

Analito (qué se busca)

Viroide de la cachexia-xiloporosis

Matriz (en qué muestra)

Material de propagación cítrico bajo certificación: plantas madre originales y de reserva, material de fundación, plantas yemeras y plantas certificadas de vivero

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Equipo de electroforesis vertical en poliacrilamida; transiluminador; equipo de transferencia e hibridación; centrífuga; homogeneizador de tejido.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Reactivos de gel de poliacrilamida; tampones de extracción de ácidos nucleicos; sonda marcada específica y reactivos de hibridación y revelado; controles positivo y negativo.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Geles y cubetas; membranas; micropipetas; planilla con la planta de origen y la especie, porque la sensibilidad del síntoma depende de ella.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Reactivos de gel; membranas; sondas; puntas.

Unidad

Ninguna · detectable o no detectable · banda característica en el gel · señal de hibridación respecto del control

Rango de referencia

La naranja dulce y el pomelo alojan el viroide sin síntoma alguno: una planta madre sana de esas especies puede ser la fuente de yemas que arruinen una plantación de mandarinas. Ojo: el síntoma en la madera tarda años, así que en la planta de vivero no hay nada que observar y el resultado de laboratorio es la única información. El análisis sólo vale si lo hace un laboratorio habilitado por el INASE: la habilitación técnica está reglada por la Resolución INASE 201/2022, y el laboratorio tiene que estar inscripto en el Registro Nacional de Comercio y Fiscalización de Semillas

Norma que lo exige

El Programa Nacional de Certificación de Cítricos, cuyas normas de funcionamiento de los laboratorios de diagnóstico aprobó la Resolución SAGPyA 98/2003; la Ley 20.247 de Semillas y Creaciones Fitogenéticas y su Decreto reglamentario 2.183/91, que hacen obligatoria la certificación del material cítrico

Norma que describe la técnica

La Resolución SAGPyA 98/2003, que fija para cachexia la electroforesis secuencial en gel de poliacrilamida y la hibridación molecular; los procedimientos del laboratorio habilitado

Edición y vigencia de la norma

Resolución SAGPyA 98/2003 vigente; procedimientos vigentes del laboratorio habilitado

Volumen de muestra

Corteza y brotes jóvenes de varios puntos de la planta, según el procedimiento del laboratorio

Conservación y transporte

Las muestras de brotes y hojas se toman con tijera desinfectada entre planta y planta, se identifican con la planta de origen y viajan refrigeradas de 4 a 8 grados, en bolsa cerrada y sin que se deshidraten. El cítrico distribuye los patógenos de manera despareja dentro del árbol, así que la toma se hace de varios puntos de la copa y no de una sola rama: una muestra de un solo brote puede dar negativo en una planta infectada. La muestra se procesa cuanto antes o se congela, y se trabaja con material libre de ribonucleasas.

Límite de detección típico

La hibridación molecular detecta cargas menores que el sPAGE

Incertidumbre típica

Resultado cualitativo; el rendimiento de la extracción domina los falsos negativos

Área

Agronomía; Biología molecular

Fecha de última actualización: 4/10/2026

Ficha N.º 4277 · ¿Ves algo para corregir? Escribinos