Virus 4 asociado al enrollamiento de la vid (GLRaV-4) en premultiplicación y plantas madre por ELISA o PCR

Fundamento

El GLRaV-4 es un ampelovirus del grupo del enrollamiento cuya denominación cambió con el tiempo: varias entidades que se numeraban por separado se reconocieron después como variantes de una misma especie y hoy se agrupan bajo este nombre. Para el laboratorio eso tiene una consecuencia práctica: los equipos serológicos y los cebadores disponibles pueden estar rotulados con las denominaciones antiguas, de modo que conviene verificar en el inserto qué variantes cubre el reactivo antes de informar un negativo. El síntoma es el del grupo —enrollamiento otoñal de las hojas con enrojecimiento o amarilleo según el color de la variedad, nervaduras verdes, retraso de maduración y menor azúcar en la uva— y no permite distinguir un virus de otro, por lo cual la identificación siempre es de laboratorio. Se transmite por material de propagación y por cochinillas. La normativa lo exige en premultiplicación y en plantas madre de categoría certificada, y admite ELISA, PCR o qPCR, con muestras compuestas de hasta cinco plantas en las técnicas moleculares y hasta tres en ELISA.

Analito (qué se busca)

Virus 4 asociado al enrollamiento de la hoja de la vid

Matriz (en qué muestra)

Material de propagación de vid bajo control y certificación: material de fundación, material de premultiplicación y plantas madre de categoría certificada

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Lector de microplacas y lavador; termociclador convencional o de tiempo real; extracción de ácidos nucleicos; centrífuga; homogeneizador de tejido; freezer.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Equipo ELISA para GLRaV-4 y sus variantes; o reactivos de extracción de ARN, retrotranscripción y cebadores específicos; controles positivo y negativo.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Microplacas o tiras; micropipetas; planilla con la planta, la categoría, la fecha y la denominación de variantes que declara el reactivo usado.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Placas y tiras; puntas con filtro; reactivos y controles.

Unidad

Ninguna · detectable o no detectable respecto del valor de corte · ciclo umbral en PCR en tiempo real

Rango de referencia

La denominación de este virus agrupa variantes que antes se numeraban por separado: antes de informar un negativo conviene verificar en el inserto qué variantes cubre el reactivo usado, porque los equipos del mercado todavía arrastran las denominaciones viejas. Ojo: el síntoma no distingue entre los cuatro virus del enrollamiento; la identificación es de laboratorio. El análisis sólo vale si lo hace un laboratorio habilitado por el INASE: la habilitación técnica está reglada por la Resolución INASE 201/2022, y el laboratorio tiene que estar inscripto en el Registro Nacional de Comercio y Fiscalización de Semillas

Norma que lo exige

La Resolución INASE 199/2018, que fija los requisitos de producción, comercialización e introducción de plantas de vivero de vid y lista en su Anexo II los virus a verificar por categoría; la Resolución INASE 703/2023, que actualizó ese Anexo II para incorporar PCR y qPCR; la Ley 20.247 y su Decreto 2.183/91norma argentina

Norma que describe la técnica

El Anexo II de la Resolución INASE 199/2018, actualizado por la Resolución INASE 703/2023; los insertos de los equipos, que declaran qué variantes cubre cada reactivonorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Resolución INASE 199/2018 con su Anexo II actualizado por la Resolución INASE 703/2023

Volumen de muestra

Hojas con pecíolo de la parte basal del sarmiento, identificadas por planta

Conservación y transporte

La muestra es tejido herbáceo u hojas con pecíolo, según el virus y la época; se identifica por planta, se refrigera de 4 a 8 grados y se procesa dentro de las 48 a 72 horas. La época de muestreo es parte del método y no un detalle de logística: la concentración del virus en la planta varía a lo largo del ciclo, y una muestra tomada fuera de la ventana puede dar negativo en una planta infectada. La ventana indicada es el final del ciclo vegetativo.

Límite de detección típico

La PCR detecta cargas menores que el ELISA

Incertidumbre típica

Resultado cualitativo

Área

Agronomía; Biología molecular

Fecha de última actualización: 4/10/2026

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