Virus A de la vid (GVA) en material de fundación por PCR

Fundamento

El virus A de la vid, GVA, es un vitivirus asociado al complejo de la madera rugosa, y en particular al acanalado del tronco de la variedad Kober: la madera bajo la corteza desarrolla acanaladuras que debilitan la unión entre púa y pie, lo que se traduce en plantas de vigor desparejo, brotación retrasada y, en los casos severos, quiebre de la unión del injerto años después de la plantación. Se transmite por material de propagación y también por cochinillas harinosas, que lo adquieren y lo transmiten de planta a planta en el viñedo. Su síntoma es tardío y poco específico, y en muchas variedades no se expresa, de modo que la inspección visual del vivero no lo detecta. La normativa lo exige en material de fundación y fija PCR como técnica: extracción del ARN total, retrotranscripción y amplificación con cebadores específicos, con lectura en gel o por fluorescencia en tiempo real. Como ocurre con el resto del grupo, la ventana de muestreo importa: la concentración del virus en el tejido cambia a lo largo del ciclo vegetativo, y una muestra tomada fuera de la época indicada puede dar negativo en una planta infectada. La presión de muestreo en fundación es del veinte por ciento del plantel por año.

Analito (qué se busca)

Virus A de la vid

Matriz (en qué muestra)

Material de propagación de vid bajo control y certificación: material de fundación, material de premultiplicación y plantas madre de categoría certificada

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Termociclador convencional o de tiempo real; equipo o columnas de extracción de ácidos nucleicos; centrífuga refrigerada; homogeneizador de tejido; freezer.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Reactivos de extracción de ARN; enzima de retrotranscripción; mezcla de amplificación con cebadores específicos de GVA; controles positivo, negativo y de extracción.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tiras y placas de PCR; micropipetas; puntas con filtro; planilla con la planta de origen, la fecha y la época del ciclo.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Tiras y placas; puntas con filtro; reactivos y controles.

Unidad

Ninguna · detectable o no detectable · ciclo umbral en PCR en tiempo real

Rango de referencia

El síntoma es tardío y en muchas variedades no se expresa, así que la inspección visual del vivero no lo encuentra. Ojo: la concentración del virus cambia a lo largo del ciclo y una muestra fuera de la época indicada puede dar negativo en una planta infectada; además lo transmiten cochinillas harinosas, de modo que un plantel sano puede reinfectarse si no se controla el vector. El análisis sólo vale si lo hace un laboratorio habilitado por el INASE: la habilitación técnica está reglada por la Resolución INASE 201/2022, y el laboratorio tiene que estar inscripto en el Registro Nacional de Comercio y Fiscalización de Semillas

Norma que lo exige

La Resolución INASE 199/2018, que fija los requisitos de producción, comercialización e introducción de plantas de vivero de vid y lista en su Anexo II los virus a verificar por categoría; la Resolución INASE 703/2023, que actualizó ese Anexo II para incorporar PCR y qPCR; la Ley 20.247 y su Decreto 2.183/91norma argentina

Norma que describe la técnica

El Anexo II de la Resolución INASE 199/2018, actualizado por la Resolución INASE 703/2023; los procedimientos del laboratorio habilitadonorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Resolución INASE 199/2018 con su Anexo II actualizado por la Resolución INASE 703/2023

Volumen de muestra

Tejido herbáceo u hojas con pecíolo identificadas por planta, según el procedimiento

Conservación y transporte

La muestra es tejido herbáceo u hojas con pecíolo, según el virus y la época; se identifica por planta, se refrigera de 4 a 8 grados y se procesa dentro de las 48 a 72 horas. La época de muestreo es parte del método y no un detalle de logística: la concentración del virus en la planta varía a lo largo del ciclo, y una muestra tomada fuera de la ventana puede dar negativo en una planta infectada. Se trabaja con material libre de ribonucleasas y la muestra se procesa o se congela sin demora.

Límite de detección típico

Lo declara el procedimiento del laboratorio

Incertidumbre típica

Resultado cualitativo; la época de muestreo y el rendimiento de la extracción pesan más que el ensayo

Área

Agronomía; Biología molecular

Fecha de última actualización: 4/10/2026

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