Virus del enrollamiento de la hoja de la papa (PLRV) en papa semilla por DAS-ELISA

Fundamento

El virus del enrollamiento de la hoja de la papa es un polerovirus que se transmite por áfidos de manera persistente —el pulgón lo adquiere en una alimentación prolongada y lo transmite durante el resto de su vida— y por el tubérculo. A diferencia de otros virus del cultivo, se multiplica en el floema y queda restringido a él, lo que tiene dos consecuencias prácticas: produce un síntoma inconfundible, el enrollamiento hacia arriba de los bordes de las hojas basales, que se vuelven coriáceas y crujen al apretarlas, y además se distribuye de manera muy despareja dentro del tubérculo, porque viaja por los haces vasculares. Esa distribución explica la indicación más particular de la norma: se emplea el brote apical para los análisis, pero para el caso del PLRV, cuanto más cerca se esté de la cosecha, hay que emplear brotes de la zona del ombligo, que es por donde el tubérculo estuvo conectado a la planta madre y donde el virus llega primero. La norma agrega otra recomendación específica para este virus: el uso de leche descremada en el tampón del conjugado, que elimina reacciones inespecíficas y es particularmente útil acá. El resto del procedimiento es el del panel: brotación previa, anticuerpos policlonales, testigos por placa y lectura a 405 nm.

Analito (qué se busca)

Virus del enrollamiento de la hoja de la papa

Matriz (en qué muestra)

Tubérculos de papa semilla de las distintas categorías y subcategorías bajo fiscalización, enviados por el semillerista al laboratorio de la red inscripta en el INASE

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Lector de microplacas con filtro de 405 nm; lavador; incubadora; recinto de brotación; homogeneizador de tejido.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Equipo DAS-ELISA para PLRV con anticuerpos policlonales; leche descremada para el tampón del conjugado; tampones de extracción y lavado; sustrato; testigos positivos de alta y baja concentración y testigos sanos.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Microplacas; micropipetas multicanal; registros de ingreso, brotación y análisis; anotación de la cercanía a la cosecha, que define de qué zona del tubérculo se toma el brote.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Placas; puntas; reactivos y testigos.

Unidad

1 · % de tubérculos positivos en la muestra, con una cifra decimal

Rango de referencia

El resultado se informa en el Certificado de Sanidad de Papa Semilla con una sola cifra decimal. Son positivas las muestras cuya absorbancia a 405 nm supera la media de los tres testigos sanos más tres veces el desvío estándar; por debajo de ese valor se consideran sanas, y si el cálculo da una interpretación dudosa decide el Director Técnico. Ojo: la lectura tiene que hacerse con lector de microplacas y el informe basarse en esa lectura, no en la apreciación visual del color; y la norma sólo permite anticuerpos policlonales. Ojo: cerca de la cosecha el brote apical puede dar negativo en un tubérculo infectado, porque el virus está en el floema y llega primero a la zona del ombligo; la norma indica tomar el brote de ahí en ese caso, y si no se respeta, el lote puede certificarse como sano sin serlo

Norma que lo exige

Los diagnósticos obligatorios de enfermedades y nematodos transmitidos a las categorías y subcategorías de papa semilla, según el Anexo III de la Resolución INASE 476/2023, Normas de Funcionamiento de Laboratorios de Análisis Fitosanitarios de Papa Semilla; la Ley 20.247 de Semillas y Creaciones Fitogenéticas y su Decreto 2.183/91. El laboratorio sólo puede hacer los ensayos para los que el INASE lo haya habilitadonorma argentina

Norma que describe la técnica

El Anexo III de la Resolución INASE 476/2023, que fija la brotación previa, el uso del brote apical, los anticuerpos policlonales, los testigos por placa y la lectura obligatoria en lector de microplacas; el protocolo de análisis virológico del laboratorio con su documento de adopción del método, aprobado por la Dirección de Evaluación de Calidad del INASE, que para PLRV indica además el uso de brotes de la zona del ombligo cuanto más cerca se esté de la cosecha y el agregado de leche descremada al tampón del conjugadonorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Resolución INASE 476/2023 vigente, Anexo III

Volumen de muestra

El número de tubérculos que fija la norma para la categoría

Conservación y transporte

Los tubérculos llegan identificados y se registran con número de ingreso, peso del lote, procedencia, especie y número de tubérculos. Antes de cualquier análisis virológico hay que brotarlos: no se puede analizar hasta que pasen tres semanas desde el inicio de la ruptura de dormición, y los tubérculos tienen que estar uniformemente brotados. Se usa un brote por tubérculo procesado. Un lote analizado antes de tiempo da negativos que no significan nada, porque el virus todavía no alcanzó concentración detectable en el brote.

Límite de detección típico

Lo fija el criterio de positividad de cada placa

Incertidumbre típica

Resultado cualitativo por tubérculo; la zona del tubérculo de la que se tomó el brote pesa más que la imprecisión del ensayo

Área

Agronomía; Microbiología

Fecha de última actualización: 4/10/2026

Ficha N.º 4293 · ¿Ves algo para corregir? Escribinos