Virus del entrenudo corto de la vid (GFLV) en material de propagación por ELISA o PCR

Fundamento

El virus del entrenudo corto, GFLV por sus siglas en inglés, produce deformación de las hojas en abanico, acortamiento de los entrenudos con nudos dobles, brotación irregular y, sobre todo, un corrimiento de flor que puede llevarse la mitad de la cosecha. Tiene dos vías de transmisión y las dos importan para el vivero: por material de propagación, porque toda planta hecha con una estaca infectada nace infectada, y por el nematodo Xiphinema index, que lo adquiere alimentándose de raíces enfermas y lo transmite a plantas sanas, lo que explica que un viñedo replantado sobre suelo infestado vuelva a enfermarse aunque se plante material sano. La normativa lo incluye en las tres categorías del sistema —fundación, premultiplicación y plantas madre de certificadas— y admite dos técnicas. El ELISA es el tamizaje masivo: anticuerpos específicos sobre extracto de tejido, lectura de color en placa, bajo costo por muestra. La PCR y sus derivados amplifican un fragmento del genoma viral a partir del ARN extraído y previa retrotranscripción, con mayor sensibilidad, que es lo que permite detectar infecciones con poca carga o en tejido donde el virus está mal distribuido. La normativa admite agrupar muestras: hasta cinco plantas por muestra compuesta en las técnicas moleculares y hasta tres en ELISA.

Analito (qué se busca)

Virus del entrenudo corto de la vid

Matriz (en qué muestra)

Material de propagación de vid bajo control y certificación: material de fundación, material de premultiplicación y plantas madre de categoría certificada

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Lector de microplacas y lavador para el ELISA; termociclador convencional o de tiempo real y equipo de extracción de ácidos nucleicos para la PCR; centrífuga; homogeneizador de tejido; heladera y freezer.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Equipo ELISA para GFLV con anticuerpo de captura y conjugado; o reactivos de extracción de ARN, retrotranscripción y amplificación con cebadores específicos; controles positivo y negativo; tampones de extracción, lavado y sustrato.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Microplacas o tiras de PCR; micropipetas; bolsas de extracción; planilla con la identificación de cada planta, la categoría del material y la fecha de muestreo.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Placas y tiras; puntas con filtro; reactivos y controles.

Unidad

Ninguna · detectable o no detectable respecto del valor de corte · ciclo umbral en PCR en tiempo real

Rango de referencia

La muestra compuesta tiene un tope normativo: hasta cinco plantas en las técnicas moleculares y hasta tres en ELISA, porque agrupar de más diluye una planta infectada por debajo de la detección. Ojo: una plantación sobre suelo con Xiphinema index se reinfecta aunque se plante material certificado sano, así que el análisis de la planta no reemplaza el del suelo. El análisis sólo vale si lo hace un laboratorio habilitado por el INASE: la habilitación técnica está reglada por la Resolución INASE 201/2022, y el laboratorio tiene que estar inscripto en el Registro Nacional de Comercio y Fiscalización de Semillas

Norma que lo exige

La Resolución INASE 199/2018, que fija los requisitos de producción, comercialización e introducción de plantas de vivero de vid y lista en su Anexo II los virus a verificar por categoría; la Resolución INASE 703/2023, que actualizó ese Anexo II para incorporar PCR y qPCR; la Ley 20.247 y su Decreto 2.183/91norma argentina

Norma que describe la técnica

El Anexo II de la Resolución INASE 199/2018, actualizado por la Resolución INASE 703/2023, que indica la técnica y la presión de muestreo por categoría; los procedimientos del laboratorio habilitadonorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Resolución INASE 199/2018 con su Anexo II actualizado por la Resolución INASE 703/2023

Volumen de muestra

Tejido herbáceo u hojas con pecíolo según el procedimiento, identificadas por planta

Conservación y transporte

La muestra es tejido herbáceo u hojas con pecíolo, según el virus y la época; se identifica por planta, se refrigera de 4 a 8 grados y se procesa dentro de las 48 a 72 horas. La época de muestreo es parte del método y no un detalle de logística: la concentración del virus en la planta varía a lo largo del ciclo, y una muestra tomada fuera de la ventana puede dar negativo en una planta infectada.

Límite de detección típico

La PCR detecta cargas bastante menores que el ELISA, que es lo que la vuelve necesaria en material de fundación

Incertidumbre típica

Resultado cualitativo. La época de muestreo y el tamaño de la muestra compuesta pesan más que la imprecisión del ensayo

Área

Agronomía; Biología molecular

Fecha de última actualización: 4/10/2026

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