Virus del jaspeado de la vid (GFkV) en material de fundación por PCR

Fundamento

El virus del jaspeado, GFkV, pertenece a la familia de los maculavirus y produce en hojas de vides indicadoras un punteado traslúcido que se ve a contraluz, del que toma el nombre. En las variedades comerciales de Vitis vinifera suele cursar sin síntomas aparentes, y ahí está la razón por la que la normativa lo exige justamente en el material de fundación: es el tipo de patógeno que, si entra en la cabecera del sistema, se multiplica sin que nadie lo note hasta que ya está repartido en todo el país. No se le conoce vector en el campo, de modo que su única vía de diseminación relevante es el material de propagación, lo que convierte al control en el vivero en el único control posible. La normativa indica PCR para esta determinación en material de fundación. El procedimiento parte de la extracción del ARN total del tejido, sigue con una retrotranscripción a ADN complementario y una amplificación con cebadores específicos del virus, y termina con la visualización del producto en gel o con la lectura de fluorescencia en tiempo real. La presión de muestreo en fundación es alta: la normativa fija el veinte por ciento de las plantas del plantel con frecuencia anual, de manera que en cinco años se recorre el plantel completo.

Analito (qué se busca)

Virus del jaspeado de la vid

Matriz (en qué muestra)

Material de propagación de vid bajo control y certificación: material de fundación, material de premultiplicación y plantas madre de categoría certificada

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Termociclador convencional o de tiempo real; equipo o columnas de extracción de ácidos nucleicos; centrífuga refrigerada; homogeneizador de tejido; cuba de electroforesis y transiluminador si la lectura es en gel; freezer.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Reactivos de extracción de ARN; enzima de retrotranscripción; mezcla de amplificación con cebadores específicos de GFkV; controles positivo y negativo y control de extracción; agarosa y colorante si la lectura es en gel.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tiras y placas de PCR; micropipetas; puntas con filtro; planilla con la planta de origen y la fecha, y el registro de qué veinte por ciento del plantel se muestreó este año.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Tiras y placas; puntas con filtro; reactivos y controles.

Unidad

Ninguna · detectable o no detectable · ciclo umbral en PCR en tiempo real

Rango de referencia

En Vitis vinifera suele no dar síntoma visible: la inspección a campo no lo encuentra y el laboratorio es la única vía. Ojo: la presión de muestreo en material de fundación es del veinte por ciento del plantel por año, así que el plantel completo recién queda recorrido al cabo de cinco años; el registro de qué plantas se muestrearon cada año es parte del control. El análisis sólo vale si lo hace un laboratorio habilitado por el INASE: la habilitación técnica está reglada por la Resolución INASE 201/2022, y el laboratorio tiene que estar inscripto en el Registro Nacional de Comercio y Fiscalización de Semillas

Norma que lo exige

La Resolución INASE 199/2018, que fija los requisitos de producción, comercialización e introducción de plantas de vivero de vid y lista en su Anexo II los virus a verificar por categoría; la Resolución INASE 703/2023, que actualizó ese Anexo II para incorporar PCR y qPCR; la Ley 20.247 y su Decreto 2.183/91norma argentina

Norma que describe la técnica

El Anexo II de la Resolución INASE 199/2018, actualizado por la Resolución INASE 703/2023; los procedimientos del laboratorio habilitado, con sus cebadores y controles documentadosnorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Resolución INASE 199/2018 con su Anexo II actualizado por la Resolución INASE 703/2023

Volumen de muestra

Tejido herbáceo u hojas con pecíolo identificadas por planta, según el procedimiento

Conservación y transporte

La muestra es tejido herbáceo u hojas con pecíolo, según el virus y la época; se identifica por planta, se refrigera de 4 a 8 grados y se procesa dentro de las 48 a 72 horas. La época de muestreo es parte del método y no un detalle de logística: la concentración del virus en la planta varía a lo largo del ciclo, y una muestra tomada fuera de la ventana puede dar negativo en una planta infectada. Para extracción de ARN se trabaja con material libre de ribonucleasas y la muestra se procesa o se congela sin demora.

Límite de detección típico

Lo declara el procedimiento del laboratorio; la PCR en tiempo real llega más abajo que la convencional en gel

Incertidumbre típica

Resultado cualitativo; el rendimiento de la extracción de ARN es la fuente principal de falsos negativos y por eso se corre un control de extracción

Área

Agronomía; Biología molecular

Fecha de última actualización: 4/10/2026

Ficha N.º 4280 · ¿Ves algo para corregir? Escribinos