Virus transmitidos por semilla por inmunoensayo o PCR

Fundamento

Que un virus se transmita por semilla cambia toda la epidemiología de una enfermedad: el patógeno llega con el lote sembrado, aparece desde el principio y repartido por todo el lote en lugar de entrar desde un borde, y ningún tratamiento al cultivo lo evita. Por eso se analiza la semilla y no la planta. La detección se hace sobre grupos de semillas o sobre plántulas obtenidas de ellas, por inmunoensayo con anticuerpos específicos cuando el virus se detecta bien por serología, o por PCR previa retrotranscripción, que es más sensible y necesaria para los virus de baja concentración. El resultado se expresa como porcentaje de semillas infectadas, que es lo que importa: la tolerancia suele ser muy baja, a veces cero en una cantidad grande de semillas, porque la tasa de transmisión a planta es alta. De ahí el punto delicado del método: el tamaño de la muestra. Para poder afirmar una tolerancia de una semilla en diez mil hay que analizar varios miles, y eso se resuelve agrupando, con el tope que el método permita sin diluir el positivo por debajo de la detección.

Analito (qué se busca)

virus transmitidos por semilla

Matriz (en qué muestra)

Semilla de soja, trigo, maíz, poroto, girasol, arroz, hortícolas y forrajeras; semilla para exportación

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cámaras de incubación con control de temperatura y de fotoperíodo con luz ultravioleta cercana; cabina de flujo laminar; lupa estereoscópica; microscopio; freezer para el método de congelamiento; termociclador de PCR en tiempo real; lector de ELISA; autoclave.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Hipoclorito para la desinfección superficial; papel de filtro; medios de cultivo generales y selectivos; kits de ELISA y de PCR para los patógenos objetivo; controles positivos.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Cajas de plástico o de Petri; pinzas; portaobjetos; bolsas de submuestreo.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Papel; medios; kits; placas.

Unidad

1

Norma que lo exige

Ley 20.247 de semillas y las resoluciones del INASE; las resoluciones del SENASA sobre requisitos fitosanitarios de importación y exportación y sobre plagas cuarentenarias, que exigen análisis de sanidad de los lotes; los requisitos de los países de destino en los certificados fitosanitarios; los protocolos de los semilleros para decidir el curadonorma argentina

Norma que describe la técnica

Las Reglas Internacionales para el Análisis de Semillas de la ISTA, capítulo de sanidad, con sus métodos por patógeno y especie; los métodos del International Seed Health Initiative y las fichas de la Organización Europea y Mediterránea de Protección de las Plantas; los manuales del SENASA y del INASE; los protocolos moleculares validados para cada patógenonorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Reglas ISTA, edición 2024; métodos ISHI vigentes

Volumen de muestra

400 a 1.000 semillas para los métodos de incubación; de 3.000 a 10.000 semillas en submuestras para los métodos moleculares de patógenos cuarentenarios

Conservación y transporte

La muestra se conserva seca y fresca hasta el análisis, porque la humedad y el calor cambian la flora de la semilla en días. La decisión de desinfectar o no la superficie define lo que se mide y tiene que estar en el informe, ya que un mismo lote da resultados muy distintos según el caso. Los patógenos cuarentenarios se confirman con un segundo método y se comunican de inmediato a la autoridad. Los medios y las condiciones de incubación son parte del método y no se improvisan, porque cada patógeno tiene el suyo.

Área

Agronomía; Microbiología; Biología molecular

A esta ficha todavía le faltan datos: el límite de detección, la incertidumbre típica. ¿Los sabés? Escribinos y la completamos.

Fecha de última actualización: 1/10/2026

Ficha N.º 4147 · ¿Ves algo para corregir? Escribinos