Virus X de la papa (PVX) en papa semilla por DAS-ELISA sobre brote apical

Fundamento

El virus X de la papa es un potexvirus con una característica que lo distingue del resto del grupo: no tiene vector insecto. Se transmite por contacto entre plantas, por las herramientas, por la maquinaria de labranza y de cosecha y por el propio tubérculo, lo que significa que su diseminación depende casi por entero del manejo. Muchas variedades lo alojan sin síntoma visible, o con un moteado leve que pasa desapercibido en el lote, y sin embargo la infección recorta el rendimiento de manera sostenida. Donde el problema se vuelve grave es en la coinfección: cuando una misma planta tiene PVX y PVY, el efecto no se suma sino que se potencia, y el cuadro resultante —el mosaico rugoso— produce deformación y arrugamiento marcados de la hoja y pérdidas muy superiores a las de cada virus por separado. Por eso la norma pide las dos determinaciones por separado y además un resultado combinado. El análisis se hace sobre el brote apical del tubérculo brotado, con las mismas condiciones que el resto del panel: tres semanas como mínimo desde la ruptura de dormición, brotación uniforme, un brote por tubérculo, anticuerpos policlonales y lectura a 405 nm en lector de microplacas.

Analito (qué se busca)

Virus X de la papa

Matriz (en qué muestra)

Tubérculos de papa semilla de las distintas categorías y subcategorías bajo fiscalización, enviados por el semillerista al laboratorio de la red inscripta en el INASE

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Lector de microplacas con filtro de 405 nm; lavador; incubadora; recinto de brotación con control de temperatura y humedad; homogeneizador de tejido.

Proveedores de Cultivo y microbiología · Baños, agitación y homogeneización.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Equipo DAS-ELISA para PVX con anticuerpos policlonales; tampones de extracción, lavado y conjugado; sustrato; testigos positivos de alta y baja concentración y testigos sanos de la variedad.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Microplacas; micropipetas multicanal; registros de ingreso, de brotación y de análisis con las lecturas del lector.

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Consumibles¿Dónde lo compro?

Placas; puntas; reactivos y testigos.

Proveedores de Reactivos y solventes · Micropipetas y puntas.

Unidad

1 · % de tubérculos positivos en la muestra, con una cifra decimal

Rango de referencia

El resultado se informa en el Certificado de Sanidad de Papa Semilla con una sola cifra decimal. Son positivas las muestras cuya absorbancia a 405 nm supera la media de los tres testigos sanos más tres veces el desvío estándar; por debajo de ese valor se consideran sanas, y si el cálculo da una interpretación dudosa decide el Director Técnico. Ojo: la lectura tiene que hacerse con lector de microplacas y el informe basarse en esa lectura, no en la apreciación visual del color; y la norma sólo permite anticuerpos policlonales. Ojo: este virus no tiene vector insecto y se transmite por contacto, herramientas y maquinaria, de modo que un resultado positivo apunta al manejo del lote y no a una presión externa de pulgones

Norma que lo exige

Los diagnósticos obligatorios de enfermedades y nematodos transmitidos a las categorías y subcategorías de papa semilla, según el Anexo III de la Resolución INASE 476/2023, Normas de Funcionamiento de Laboratorios de Análisis Fitosanitarios de Papa Semilla; la Ley 20.247 de Semillas y Creaciones Fitogenéticas y su Decreto 2.183/91. El laboratorio sólo puede hacer los ensayos para los que el INASE lo haya habilitadonorma argentina

Norma que describe la técnica

El Anexo III de la Resolución INASE 476/2023, que fija la brotación previa, el uso del brote apical, los anticuerpos policlonales, los testigos por placa y la lectura obligatoria en lector de microplacas; el protocolo de análisis virológico del laboratorio con su documento de adopción del método, aprobado por la Dirección de Evaluación de Calidad del INASEnorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Resolución INASE 476/2023 vigente, Anexo III

Volumen de muestra

El número de tubérculos que fija la norma para la categoría

Conservación y transporte

Los tubérculos llegan identificados y se registran con número de ingreso, peso del lote, procedencia, especie y número de tubérculos. Antes de cualquier análisis virológico hay que brotarlos: no se puede analizar hasta que pasen tres semanas desde el inicio de la ruptura de dormición, y los tubérculos tienen que estar uniformemente brotados. Se usa un brote por tubérculo procesado. Un lote analizado antes de tiempo da negativos que no significan nada, porque el virus todavía no alcanzó concentración detectable en el brote.

Límite de detección típico

Lo fija el criterio de positividad de cada placa: media de los testigos sanos más tres desvíos

Incertidumbre típica

Resultado cualitativo por tubérculo; el porcentaje del lote arrastra la incertidumbre del muestreo

Área

Agronomía; Microbiología

Fecha de última actualización: 4/10/2026

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