Xylella fastidiosa, agente de la clorosis variegada de los cítricos, en material de propagación por DAS-ELISA

Fundamento

Xylella fastidiosa es una bacteria que vive exclusivamente dentro del xilema, los vasos que suben agua desde la raíz. Al multiplicarse forma agregados y biopelícula que obstruyen esos vasos, de modo que la planta sufre un estrés hídrico permanente aunque el suelo tenga agua: las hojas muestran un moteado clorótico que se ve del revés como lesiones pardas, los entrenudos se acortan y la fruta queda pequeña, endurecida y sin valor comercial. Se transmite por chicharritas que se alimentan del xilema y, para lo que le importa al vivero, por el injerto. La detección de rutina en el material de propagación es serológica, por DAS-ELISA con anticuerpos específicos sobre extracto de nervadura y pecíolo, que es donde la bacteria se concentra. El muestreo tiene una dificultad propia: la colonización del xilema es irregular y en parches, de manera que la bacteria puede estar en una rama y no en la de al lado. Por eso se muestrean varias ramas de distintas orientaciones de la copa y se prefieren hojas maduras con nervadura bien formada antes que brotes tiernos.

Analito (qué se busca)

Xylella fastidiosa

Matriz (en qué muestra)

Material de propagación cítrico bajo certificación: plantas madre originales y de reserva, material de fundación, plantas yemeras y plantas certificadas de vivero

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Lector de microplacas; lavador de placas; incubadora; homogeneizador de tejido; heladera.

Proveedores de Cultivo y microbiología · Baños, agitación y homogeneización.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Equipo DAS-ELISA para Xylella fastidiosa con anticuerpo de captura y conjugado; tampones de extracción, lavado y sustrato; controles positivo y negativo.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Microplacas; micropipetas; bolsas de extracción; planilla con la planta de origen y la orientación de la rama muestreada.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Placas; puntas; reactivos y controles.

Proveedores de Reactivos y solventes · Micropipetas y puntas.

Unidad

Ninguna · detectable o no detectable respecto del valor de corte

Rango de referencia

La bacteria coloniza el xilema en parches: puede estar en una rama y no en la de al lado, así que un negativo sobre pocas ramas no descarta la infección. Ojo: se muestrea nervadura y pecíolo de hojas maduras de varias orientaciones de la copa, no brotes tiernos. El análisis sólo vale si lo hace un laboratorio habilitado por el INASE: la habilitación técnica está reglada por la Resolución INASE 201/2022, y el laboratorio tiene que estar inscripto en el Registro Nacional de Comercio y Fiscalización de Semillas

Norma que lo exige

El Programa Nacional de Certificación de Cítricos, cuyas normas de funcionamiento de los laboratorios de diagnóstico aprobó la Resolución SAGPyA 98/2003; la Ley 20.247 de Semillas y Creaciones Fitogenéticas y su Decreto reglamentario 2.183/91, que hacen obligatoria la certificación del material cítrico

Norma que describe la técnica

La Resolución SAGPyA 98/2003, que aprueba las normas del laboratorio de diagnóstico y la extracción de muestras; los procedimientos del laboratorio habilitado

Edición y vigencia de la norma

Resolución SAGPyA 98/2003 vigente; insertos vigentes de los equipos en uso

Volumen de muestra

Hojas maduras con pecíolo de 4 a 8 ramas por planta, de distintas orientaciones

Conservación y transporte

Las muestras de brotes y hojas se toman con tijera desinfectada entre planta y planta, se identifican con la planta de origen y viajan refrigeradas de 4 a 8 grados, en bolsa cerrada y sin que se deshidraten. El cítrico distribuye los patógenos de manera despareja dentro del árbol, así que la toma se hace de varios puntos de la copa y no de una sola rama: una muestra de un solo brote puede dar negativo en una planta infectada.

Límite de detección típico

Lo declara el equipo comercial en uso

Incertidumbre típica

Resultado cualitativo contra el valor de corte; la variabilidad dominante es la del muestreo

Área

Agronomía; Microbiología

Fecha de última actualización: 4/10/2026

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