Cianotoxinas neurotóxicas y citotóxicas por LC-MS/MS y por ELISA

Fundamento

La muestra se somete a ciclos de congelado y descongelado para romper las células y liberar la toxina intracelular, y se filtra. El extracto se limpia por fase sólida y se inyecta en cromatografía líquida acoplada a masas en tándem, que identifica cada variante por sus transiciones. Los kits de ELISA sirven de tamizaje rápido en el campo, pero dan la suma del grupo y hay que confirmarlos por espectrometría.

Analito (qué se mide)

Saxitoxinas, cilindrospermopsina y anatoxina-a

Matriz (en qué muestra)

Agua de embalses y de potabilizadoras; agua de recreación

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafo líquido con masas en tándem; freezer a -20 °C; equipo de extracción en fase sólida; lector de microplacas para ELISA; sonicador.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Patrones certificados de saxitoxina, cilindrospermopsina y anatoxina-a; kits ELISA; metanol y acetonitrilo de grado espectrometría; ácido fórmico.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Frascos de vidrio ámbar; viales; filtros de fibra de vidrio; microplacas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Patrones certificados, que son caros y de vida corta; kits ELISA.

Unidad

µg/L · ng/L · toxina intracelular y extracelular por separado

Rango de referencia

Valores guía de la OMS para agua de consumo: 0,7 µg/L de cilindrospermopsina y 30 µg/L de anatoxina-a

Norma que lo exige

Guías provinciales de vigilancia de cianobacterias; Guías de la OMS para la calidad del agua de consumo humano, 4ª edición, que en su adenda de 2020 fija valores guía para cilindrospermopsina y anatoxina-anorma internacional

Norma que describe la técnica

ISO 20179 (microcistinas, como referencia metodológica del grupo); EPA 545 (cilindrospermopsina y anatoxina-a); métodos de la AOAC para saxitoxinasnorma internacional

Edición y vigencia de la norma

Adenda 2020 de las guías de la OMS; EPA 545 (2015)

Volumen de muestra

500 mL a 1 L en frasco de vidrio ámbar

Conservación y transporte

Se congela apenas llega, y ese congelado es parte del método: rompe las células y libera la toxina que está adentro, que en una floración es la mayor parte del total. Si interesa separar la fracción disuelta de la intracelular hay que filtrar antes de congelar y analizar el filtrado y el filtro por separado. No se agrega conservante químico. Vidrio y no plástico, porque varias de estas toxinas se adsorben.

Límite de detección típico

0,05 a 0,2 µg/L por LC-MS/MS

Incertidumbre típica

±20 a 30%; el ELISA sobreestima cuando hay variantes que el anticuerpo reconoce parcialmente

Área

Aguas; Toxicología; Microbiología

Fecha de última actualización: 8/9/2026