Clorofila a por extracción con acetona y espectrofotometría o fluorimetría

Fundamento

Se filtra un volumen conocido de agua, se rompen las células del filtro y se extrae el pigmento con acetona al 90 % en frío y en oscuridad; después se lee la absorbancia o la fluorescencia. Todo el procedimiento se hace rápido y sin luz: la clorofila se degrada en minutos expuesta al sol.

Analito (qué se busca)

Clorofila a

Matriz (en qué muestra)

Embalses; lagunas; ríos; agua cruda

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Espectrofotómetro con celdas de 1 a 10 cm, o fluorímetro; equipo de filtración por vacío; homogeneizador o mortero; centrífuga; heladera.

Proveedores de Baños, agitación y homogeneización · Filtración y purificación de agua · Espectrofotometría UV-Vis.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Acetona al 90 %; carbonato de magnesio; patrón de clorofila a; agua destilada.

Proveedores de Filtración y purificación de agua.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Filtros de fibra de vidrio; tubos de centrífuga ámbar; pinzas; registro del volumen filtrado y de la hora de muestreo.

Proveedores de Centrífugas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Filtros; acetona; patrón de clorofila.

Unidad

µg/L · mg/m³ · % de feopigmentos sobre el total

Rango de referencia

Es el indicador con el que se clasifica el estado trófico: por encima de unos 10 microgramos por litro el cuerpo de agua se considera eutrófico

Norma que lo exige

Programas provinciales de monitoreo de calidad de cuerpos de agua; Ley 24.051 de residuos peligrosos y su Decreto 831/93, Anexo II, niveles guía de calidad de agua para protección de la vida acuáticanorma internacional

Norma que describe la técnica

ISO 10260; APHA Standard Methods 10200 H; EPA 445.0 (fluorimetría)norma internacional

Edición y vigencia de la norma

ISO 10260:1992, vigente

Volumen de muestra

1 a 2 L si el agua es clara; 250 mL en aguas con floración

Conservación y transporte

Lo ideal es filtrar en el lugar y guardar el filtro, no el agua: la clorofila se degrada en horas con la luz. Si se filtra en el laboratorio, la muestra va en frasco opaco, refrigerada, y se procesa el mismo día. El filtro se conserva doblado en papel de aluminio a -20 °C y así aguanta semanas. Todo el trabajo de extracción se hace en penumbra: la luz del propio laboratorio destruye el pigmento en el extracto.

Límite de detección típico

0,1 µg/L con celda de 10 cm; menos por fluorimetría

Incertidumbre típica

±10 a 20%; el reparto entre clorofila y feopigmentos depende de la exactitud del paso de acidificación

Área

Aguas; Ambiental; Química analítica

Fecha de última actualización: 1/10/2026

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