Coliformes fecales, Salmonella y huevos de helmintos viables en biosólidos

Fundamento

Los coliformes fecales se determinan por el número más probable en tubos múltiples sobre la muestra homogeneizada y diluida, incubando a 44,5 °C. Salmonella se busca por preenriquecimiento, enriquecimiento selectivo y siembra en agares diferenciales. Los huevos de helmintos se concentran por flotación en solución densa y se cuentan al microscopio; la viabilidad se evalúa incubando y observando el desarrollo larvario.

Analito (qué se mide)

Indicadores fecales y patógenos en barros

Matriz (en qué muestra)

Barros y biosólidos destinados a aplicación al suelo

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Estufas a 35 y 44,5 °C; cabina de seguridad biológica; microscopio óptico; centrífuga; homogeneizador; cámaras de conteo.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Caldos lauril sulfato y EC; medios de enriquecimiento y agares selectivos para Salmonella; solución de sulfato de zinc o de flotación; ácido sulfúrico 0,1 N para la incubación de huevos.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos con campana Durham; placas; portaobjetos; tamices.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios de cultivo; material descartable.

Unidad

NMP/g de sólidos secos · huevos viables por gramo de sólidos secos · Presencia o ausencia de Salmonella en 4 g · clase del biosólido

Rango de referencia

Para el nivel más exigente se pide menos de 1.000 NMP/g de coliformes fecales, ausencia de Salmonella y menos de 1 huevo viable de helminto por gramo de sólidos secos

Norma que lo exige

Resolución 97/2001 de la Secretaría de Desarrollo Sustentable, sobre gestión de barros generados en plantas de tratamiento de efluentes líquidos, que clasifica los barros por su calidad microbiológica y define las condiciones de aplicación al suelo; Ley 25.612 de gestión integral de residuos industriales y de actividades de servicionorma internacional

Norma que describe la técnica

EPA 1680 y EPA 1682 (coliformes fecales y Salmonella en biosólidos); método EPA/625/R-92/013 para huevos de helmintos; APHA Standard Methods 9221 Enorma internacional

Edición y vigencia de la norma

EPA 1680 revisión de 2014; Resolución 97/2001

Volumen de muestra

1 a 2 kg de barro, compuesto de varias submuestras del lote o de la pila

Conservación y transporte

La muestra se toma compuesta de varios puntos del lote: un barro no es homogéneo y la contaminación se concentra en zonas. Se transporta refrigerada a 4 °C, sin congelar, y se procesa dentro de las 24 horas, porque los coliformes decaen rápido. Los huevos de helminto, en cambio, sobreviven meses, así que esa determinación tolera más demora. Todo el resultado se expresa por gramo de sólidos secos, así que hay que determinar la humedad en paralelo.

Límite de detección típico

1 NMP/g; 1 huevo por gramo de sólidos secos

Incertidumbre típica

El número más probable tiene intervalos amplios; el conteo de huevos depende mucho de la eficiencia de recuperación, que conviene verificar con muestras sembradas

Área

Efluentes; Microbiología; Residuos y compost

Fecha de última actualización: 8/9/2026