Detección de Salmonella en agua por filtración y enriquecimiento selectivo

Fundamento

Un volumen grande se filtra por membrana o se concentra, y el retenido se incuba primero en un caldo de preenriquecimiento no selectivo, que permite recuperar las células dañadas por el ambiente. Después pasa a caldos selectivos —Rappaport-Vassiliadis y Müller-Kauffmann— que inhiben la flora acompañante, y de ahí a agares diferenciales donde Salmonella forma colonias características. Las colonias sospechosas se confirman por pruebas bioquímicas y serológicas o por PCR.

Analito (qué se mide)

Salmonella spp.

Matriz (en qué muestra)

Agua superficial; agua de riego; efluente; agua de recreación

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Estufas a 37 y a 41,5 °C; equipo de filtración por membrana; cabina de seguridad biológica; termociclador para la confirmación molecular.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Agua peptonada tamponada; caldos Rappaport-Vassiliadis y Müller-Kauffmann; agar XLD y agar verde brillante; sueros de aglutinación; kits de identificación bioquímica.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Membranas de 0,45 µm; placas; tubos; asas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios de cultivo; sueros; membranas.

Unidad

Presencia o ausencia en el volumen ensayado · NMP/L si se hace por dilución en tubos múltiples · serovar identificado

Rango de referencia

El criterio habitual es ausencia en 1 litro para agua de riego de hortalizas de consumo crudo

Norma que lo exige

Ley 24.051 de residuos peligrosos y su Decreto 831/93, Anexo II, niveles guía de calidad de agua para agua de riego y de uso recreativo; Resolución SENASA sobre agua de riego de frutas y hortalizas frescasargentina e internacional

Norma que describe la técnica

ISO 19250 (detección de Salmonella en agua); APHA Standard Methods 9260 D; ISO 6579-1 como referencia del esquema de enriquecimientoargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

ISO 19250:2010, vigente

Volumen de muestra

1 a 5 L en frasco estéril con tiosulfato si el agua está clorada

Conservación y transporte

El volumen importa: buscar Salmonella en 100 mL de un río es casi garantía de negativo, y por eso se filtra al menos un litro. Se refrigera a 4 °C y se procesa dentro de las 24 horas, sin congelar, porque el congelado daña las células y el preenriquecimiento no alcanza a recuperarlas. Si el agua trae mucho sedimento, se procesa también el sedimento: Salmonella se asocia a las partículas.

Límite de detección típico

1 célula viable en el volumen ensayado, si el enriquecimiento funciona

Incertidumbre típica

El resultado es cualitativo; la sensibilidad depende del volumen filtrado y de la competencia de la flora acompañante

Área

Aguas; Microbiología; Agronomía

Fecha de última actualización: 8/9/2026