Detección y enumeración de coliformes en agua por el método del número más probable

Fundamento

Se siembra la muestra en varias series de tubos con medio selectivo y distintos volúmenes, se incuba y se lee cuáles dieron positivo: el patrón de tubos positivos se convierte en un número más probable por tabla estadística. No es un recuento sino una estimación, con un intervalo de confianza ancho que forma parte del resultado. El frasco lleva tiosulfato cuando el agua está clorada, porque si no el cloro residual sigue matando durante el transporte y el resultado sale negativo por el motivo equivocado.

Analito (qué se busca)

Coliformes

Matriz (en qué muestra)

Agua potable de red, de pozo y de camión cisterna; agua turbia o con alta carga de partículas; agua de recreación y de piscinas; agua envasada; agua de establecimientos rurales sin red

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Estufas de incubación a las temperaturas del método; baño termostático; cabina de seguridad biológica; lámpara ultravioleta para los medios fluorogénicos; autoclave; pipetas automáticas.

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Reactivos¿Dónde lo compro?

Medios líquidos selectivos con campana de fermentación o con sustratos cromogénicos; medios de confirmación; agua de dilución con peptona; tiosulfato de sodio; cepas de referencia certificadas.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos con campana de fermentación; recipientes de presencia o ausencia; pipetas estériles; frascos de muestreo estériles con tiosulfato; planillas de patrón de tubos positivos y tablas de número más probable.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios; tubos; pipetas; cepas de referencia.

Unidad

1/m³ · número más probable por 100 mL y su intervalo de confianza · resultado de presencia o ausencia en el volumen reglamentario · patrón de tubos positivos por dilución · confirmaciones realizadas y medios empleados · cloro residual de la muestra y neutralización aplicada

Rango de referencia

En agua de red el criterio es de ausencia; en otras matrices se informa el número más probable por cada cien mililitros con su intervalo

Norma que lo exige

El Código Alimentario y las reglamentaciones provinciales de agua de consumo humano, que exigen ausencia de coliformes y de Escherichia coli en cien mililitros; las normas de agua envasada y de agua de recreación; los requisitos de control de agua de establecimientos de salud; las normas de acreditación del laboratorionorma argentina

Norma que describe la técnica

IRAM 29107-2, sobre la detección mediante presencia o ausencia y la enumeración por el método del número más probable con tubos múltiples de organismos coliformes y Escherichia colinorma argentina

Edición y vigencia de la norma

IRAM 29107-2:2023; IRAM 29106:2024; IRAM 29107-1:2015; IRAM 29108:2008; IRAM 29012-5:2026

Volumen de muestra

Destructivo. De 100 a 300 mL de agua por determinación

Conservación y transporte

Los frascos llevan tiosulfato cuando el agua está clorada, porque el cloro residual sigue matando durante el transporte y el resultado sale negativo por el motivo equivocado. El tiempo entre la toma y la siembra se respeta y se registra, dado que fuera de él la flora se modifica. El intervalo de confianza se informa junto con el número más probable: presentarlo como un recuento exacto es engañoso y lleva a discutir diferencias que no existen.

Límite de detección típico

Un microorganismo en el volumen total sembrado, según el esquema de tubos y diluciones

Incertidumbre típica

El intervalo de confianza del número más probable es amplio y propio del esquema empleado; se informa siempre

Área

Aguas; Microbiología; Higiene y seguridad

Fecha de última actualización: 1/10/2026

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