Determinación del poder enzimático de hidrolizantes de almidones para desencolado textil

Fundamento

El método mide la velocidad con que el preparado enzimático hidroliza al almidón en condiciones definidas. Se prepara una solución de almidón de referencia, se la lleva a la temperatura y al pH óptimos de la enzima y se agrega una cantidad medida del preparado; a intervalos se toman alícuotas y se detiene la reacción, y se determina el avance de la hidrólisis por alguno de dos caminos: el descenso del color de la reacción con yodo, que es intenso y azul con el almidón entero y desaparece a medida que se rompe en fragmentos cortos, o el aumento de los azúcares reductores liberados, determinados por métodos colorimétricos o titulométricos. Con el tiempo necesario para alcanzar un punto final definido se calcula el poder enzimático, expresado en unidades por gramo o por mililitro de preparado respecto de una referencia. Las condiciones son críticas y forman parte de la definición de la unidad: la temperatura, el pH, la concentración del sustrato y la presencia de calcio, que estabiliza a muchas amilasas, cambian la actividad medida de manera drástica, y por eso los valores de dos proveedores solo se comparan si se determinaron con el mismo método. Se evalúa además la estabilidad del preparado en almacenamiento y su termoestabilidad, que define si sirve para el desencolado en caliente.

Matriz (en qué muestra)

Preparados enzimáticos para desencolado de tejidos de algodón; amilasas bacterianas y fúngicas; productos de desencolado en recepción de partida; formulaciones en comparación de actividad

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Baño termostático de alta estabilidad; espectrofotómetro ultravioleta visible; pH-metro; cronómetro; balanza analítica; material volumétrico; agitador magnético.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Almidón soluble de referencia; solución de yodo-yoduro; reactivos de determinación de azúcares reductores; soluciones reguladoras de pH; sales de calcio; preparado enzimático de referencia.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos y matraces; pipetas automáticas; planillas de absorbancia contra tiempo; identificación del preparado, su lote y su fecha.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Reactivos; sustrato; preparado enzimático.

Unidad

kat · poder enzimático expresado en unidades por gramo o por mililitro · temperatura, pH y concentración de sustrato del ensayo · presencia y concentración de calcio · estabilidad del preparado en almacenamiento y termoestabilidad · resultado del preparado de referencia en paralelo

Rango de referencia

La actividad enzimática cae con el tiempo de almacenamiento y con la temperatura, de modo que un preparado que llega con la actividad declarada puede no tenerla meses después; verificarla al recibir y antes de usar es lo que evita desencolados incompletos y partidas con teñido desparejo

Norma que lo exige

Las especificaciones de compra de preparados enzimáticos para desencolado y los controles de recepción; los procedimientos de control de proceso de las plantas de preparación de tejidos; los requisitos de constancia de actividad de los proveedores; las normas de acreditación del laboratorionorma argentina

Norma que describe la técnica

IRAM 25704, que fija el método de determinación del poder enzimático de los hidrolizantes de almidones; IRAM 25702, sobre la efectividad de los auxiliares destinados al descrude; IRAM 25732, sobre el carácter iónico de los auxiliares textilesnorma argentina

Edición y vigencia de la norma

IRAM 25704:1985; IRAM 25702:1965; IRAM 25732:1984

Volumen de muestra

Destructivo. Pequeñas cantidades de preparado por determinación

Conservación y transporte

La temperatura y el pH se controlan con rigor porque la actividad enzimática depende de manera exponencial de ellos, y una diferencia de un grado o de una décima de pH cambia el resultado de manera apreciable. El preparado se conserva refrigerado y se registra su fecha, dado que la actividad decae. Se ensaya siempre un preparado de referencia en paralelo para dar sentido a la unidad.

Límite de detección típico

El método detecta actividades bajas con tiempos de reacción prolongados

Incertidumbre típica

Del 5 al 15 % relativo, dominada por el control de temperatura y de pH

Área

Materiales/industrial; Química analítica; Biología molecular

Fecha de última actualización: 11/9/2026