Enterococos intestinales por filtración por membrana en medio selectivo

Fundamento

Un volumen conocido se filtra por membrana de 0,45 µm, que retiene las bacterias. La membrana se coloca sobre un medio selectivo con azida de sodio, que inhibe a los gram negativos, y un indicador que los enterococos reducen dando colonias rojas o marrones. La confirmación se hace transfiriendo la membrana a un medio con esculina y bilis, donde los enterococos hidrolizan la esculina y forman un halo negro.

Analito (qué se mide)

Enterococos intestinales

Matriz (en qué muestra)

Agua de recreación; agua costera y de río; agua potable

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Equipo de filtración por membrana con bomba de vacío; estufa a 36 y a 44 °C; contador de colonias; cabina de seguridad biológica.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Agar Slanetz y Bartley; agar bilis-esculina-azida; agua de dilución tamponada; tiosulfato de sodio.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Membranas de éster de celulosa de 0,45 µm cuadriculadas; embudos de filtración esterilizables; pinzas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Membranas; medios de cultivo.

Unidad

UFC/100 mL · NMP/100 mL · UFC/mL

Rango de referencia

Agua potable: ausencia en 100 mL. Agua de recreación: los criterios de la OMS ubican el nivel de alerta cerca de 200 UFC/100 mL

Norma que lo exige

Código Alimentario Argentino, artículo 982 (agua potable de suministro público y de uso domiciliario); normativa provincial y municipal de aptitud de aguas de baño; Ley 24.051 de residuos peligrosos y su Decreto 831/93, Anexo II, niveles guía de calidad de agua para uso recreativo con contacto directoargentina e internacional

Norma que describe la técnica

ISO 7899-2 (filtración por membrana) e ISO 7899-1 (NMP en microplaca); APHA Standard Methods 9230 C; EPA 1600argentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

ISO 7899-2:2000, vigente

Volumen de muestra

250 mL en frasco estéril con tiosulfato

Conservación y transporte

Igual que para coliformes: frasco estéril con tiosulfato, sin enjuagar con la muestra y sin llenar hasta el borde, para poder homogeneizar antes de filtrar. Se refrigera a 4 °C y se procesa dentro de las 24 horas; en aguas de recreación, donde la decisión es de ese mismo día, conviene no pasar de 6 horas. En aguas turbias hay que filtrar volúmenes menores o la membrana se tapa y las colonias no se distinguen.

Límite de detección típico

1 UFC/100 mL

Incertidumbre típica

Intervalo de Poisson del recuento; la placa útil tiene entre 15 y 150 colonias

Área

Aguas; Microbiología; Ambiental

Fecha de última actualización: 8/9/2026