Evaluación de membranas filtrantes y recuento de microorganismos cultivables en agua

Fundamento

La evaluación de membranas compara el desempeño de un lote contra criterios definidos: se determinan el diámetro de poro efectivo por retención de una suspensión de un microorganismo de tamaño conocido, la recuperación de un inóculo de referencia respecto de un método sin membrana, la ausencia de inhibición por residuos de tensioactivos o de solventes del proceso de fabricación, la regularidad de la cuadrícula impresa y la estabilidad dimensional en el medio; el lote se acepta o se rechaza según esos resultados, y la verificación se repite con cada compra. El recuento de microorganismos cultivables, por su parte, es el parámetro general de la calidad microbiológica del agua: una alícuota se siembra por incorporación en un medio nutritivo agarizado, se incuba a la temperatura y el tiempo que fija el método —con condiciones distintas según se busque la flora adaptada al ambiente o la de origen humano— y se cuentan las colonias formadas, expresando el resultado por mililitro. No es un indicador de patógenos sino de la eficacia global del tratamiento y de la integridad de la red: un aumento del recuento en un punto de la distribución indica recrecimiento o entrada de agua ajena, aunque los coliformes sigan ausentes, y por eso se lo usa como señal temprana en los planes de seguridad del agua.

Matriz (en qué muestra)

Membranas filtrantes de distintos lotes y proveedores; medios de cultivo preparados y deshidratados; agua potable, envasada y de proceso; laboratorios de microbiología del agua en acreditación

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Sistema de filtración por membrana con rampa y bomba de vacío; estufas de incubación a las distintas temperaturas; autoclave; contador de colonias con lupa; cabina de seguridad biológica; baño termostático para el agar; balanza analítica.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Medios nutritivos agarizados y medios selectivos; cepas de referencia certificadas; agua de dilución con peptona; tiosulfato para neutralizar cloro; suspensiones de referencia para el ensayo de retención.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Membranas filtrantes de los lotes a evaluar; placas de Petri; pipetas estériles; pinzas; planillas de recuento y de evaluación de lote; registros de trazabilidad de medios y de membranas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Membranas; medios de cultivo; placas; cepas de referencia.

Unidad

Ninguna · recuento de microorganismos cultivables por mililitro y condiciones de incubación · recuperación del lote de membranas respecto del método de referencia (%) · retención del microorganismo de ensayo · ausencia de inhibición y regularidad de la cuadrícula · trazabilidad del lote de membranas y de medios

Rango de referencia

Los límites reglamentarios de recuento de microorganismos en agua potable se expresan en unidades formadoras de colonias por mililitro y son holgados comparados con los de indicadores fecales, porque lo que se vigila no es la presencia de patógenos sino la tendencia: el valor importa menos que su aumento respecto del histórico del punto

Norma que lo exige

El Código Alimentario y las reglamentaciones provinciales de agua de consumo, que fijan límites de recuento de microorganismos y exigen métodos normalizados; las normas de acreditación de laboratorios de microbiología, que requieren el control de medios y de materiales críticos; los planes de seguridad del agua de los prestadores; las normas de agua envasadanorma argentina

Norma que describe la técnica

IRAM 29104, que fija la evaluación de membranas filtrantes utilizadas para análisis microbiológicos; IRAM 29122, sobre el recuento de microorganismos cultivables mediante recuento de colonias en un medio nutritivo agarizado; IRAM 29107-1, sobre la detección y el recuento de coliformes y Escherichia coli por filtración por membrana; IRAM 29012-5, sobre el muestreo de agua potable en plantas y en redesnorma argentina

Edición y vigencia de la norma

IRAM 29104:2007; IRAM 29122:2022; IRAM 29107-1:2015; IRAM 29012-5:2026

Volumen de muestra

Destructivo. De 1 a 100 mL de agua según el recuento esperado

Conservación y transporte

Cada lote de membranas y de medio se evalúa antes de usarlo en muestras reales y se registra: un lote inhibitorio produce recuentos bajos durante meses y se descubre recién cuando alguien compara con otro laboratorio. Las muestras cloradas se toman en frascos con tiosulfato, ya que el cloro residual sigue actuando en el frasco. El tiempo entre la toma y la siembra se respeta, dado que la flora cambia en pocas horas.

Límite de detección típico

Una unidad formadora de colonias en el volumen filtrado o sembrado

Incertidumbre típica

La distribución de colonias es de Poisson y la incertidumbre relativa depende del recuento obtenido

Área

Aguas; Microbiología; Metrología y calibración

Fecha de última actualización: 11/9/2026