Glifosato y ácido aminometilfosfónico en agua por cromatografía líquida con detección fluorométrica y por espectrometría de masas

Fundamento

El glifosato es una molécula pequeña, muy polar, anfótera y sin grupos cromóforos ni fluoróforos, que no se extrae con solventes orgánicos ni retiene en las columnas de fase reversa habituales; su metabolito principal, el ácido aminometilfosfónico, comparte esas propiedades y es más persistente. La vía clásica resuelve el problema derivatizando: la muestra se hace reaccionar con cloruro de 9-fluorenilmetoxicarbonilo, que se une al grupo amino y produce un derivado fluorescente y mucho menos polar, que se separa por cromatografía líquida de fase reversa y se detecta por fluorescencia con muy buena sensibilidad; la derivatización se puede hacer antes de la columna, en lote o en línea. La vía moderna emplea cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas en tándem, con o sin derivatización, usando columnas de intercambio o de interacción hidrofílica para retener al analito subyacente; da identificación inequívoca y permite cuantificar ambos compuestos con patrones internos marcados. La presencia de cationes divalentes en el agua es la interferencia crítica en las dos vías, porque el glifosato los quela con fuerza y queda retenido o no reacciona, y por eso el método incluye un paso de acomplejamiento.

Analito (qué se mide)

Glifosato y ácido aminometilfosfónico en agua

Matriz (en qué muestra)

Agua superficial de arroyos y canales de zonas agrícolas; agua subterránea de pozos someros en área rural; agua de lluvia; agua potable de red en localidades del área pampeana; agua de escorrentía de lotes tratados

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafo líquido con detector de fluorescencia y sistema de derivatización en línea; cromatógrafo líquido acoplado a espectrómetro de masas en tándem; columnas de fase reversa y de intercambio o interacción hidrofílica; baño termostático; equipo de filtración; balanza analítica.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Patrones certificados de glifosato y de ácido aminometilfosfónico y sus análogos marcados isotópicamente; cloruro de 9-fluorenilmetoxicarbonilo; borato y agentes de acomplejamiento de cationes; solventes de calidad para espectrometría de masas; agua ultrapura.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Viales y filtros de bajo desprendimiento; frascos de muestreo; planillas de recuperación y de curvas de calibración; cadena de custodia refrigerada.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Reactivo de derivatización; patrones marcados; columnas; solventes.

Unidad

kg/m³ · concentración de glifosato y de ácido aminometilfosfónico (µg/L) · relación entre el metabolito y el compuesto de origen, que informa sobre el tiempo transcurrido desde la aplicación · dureza y contenido de cationes divalentes de la muestra · recuperación sobre adición y sobre patrón marcado · rendimiento de la derivatización

Rango de referencia

Los valores de referencia para agua de consumo se ubican en el orden de decenas a centenas de microgramos por litro según la guía adoptada, y los niveles de protección de la vida acuática son mucho más bajos; en aguas superficiales de zonas agrícolas los hallazgos habituales están en el rango de unidades de microgramo por litro y aumentan de manera marcada después de las lluvias

Norma que lo exige

Las normas de calidad de agua para consumo humano y para protección de la vida acuática, que fijan valores de referencia para glifosato; los programas de vigilancia de cuencas con actividad agrícola; los monitoreos comprometidos en estudios de impacto ambiental y en causas judiciales; las normas de acreditación del laboratorionorma argentina

Norma que describe la técnica

IRAM 29037, que fija la determinación de glifosato y ácido aminometilfosfónico por cromatografía líquida de alta resolución con detección fluorométrica; IRAM 29050, sobre la determinación por cromatografía líquida en tándem con detección masa/masa; IRAM 29012-6, sobre el muestreo de ríos y arroyos; IRAM 29048, sobre el control de la calidad analíticanorma argentina

Edición y vigencia de la norma

IRAM 29037:2015; IRAM 29050:2024; IRAM 29012-6:2019; IRAM 29048:2023

Volumen de muestra

Destructivo. De 50 a 250 mL de agua por determinación

Conservación y transporte

La muestra se toma en frasco de vidrio o de polipropileno y se congela si el análisis no es inmediato, porque el glifosato se degrada por vía microbiana en pocos días y se adsorbe a las partículas en suspensión: filtrar o no filtrar cambia el resultado y se informa. El agua dura exige el paso de acomplejamiento, dado que sin él el calcio y el magnesio secuestran al analito y la recuperación se desploma sin dar aviso.

Límite de detección típico

Del orden de 0,1 µg/L para ambos compuestos

Incertidumbre típica

Del 15 al 25 % relativo, dominada por la derivatización y por la matriz

Área

Aguas; Química analítica; Agronomía

Fecha de última actualización: 11/9/2026