Recuento de colifagos somáticos por el método de la doble capa de agar

Fundamento

La muestra se mezcla con una cepa hospedadora de Escherichia coli y con agar semisólido, y se vuelca sobre una placa de agar. Cada fago infecta una bacteria, se multiplica y lisa a las vecinas, dejando una zona clara —una placa de lisis— sobre el césped bacteriano.

Analito (qué se mide)

Colifagos somáticos

Matriz (en qué muestra)

Agua; efluente; barro

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Estufa a 37 °C; baño a 45 °C; cabina de bioseguridad; centrífuga.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Cepa hospedadora WG5 o similar; agar semisólido; caldo triptona; cloroformo.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Placas de Petri; tubos; pipetas estériles.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios; cepa de referencia; placas.

Unidad

UFP/100 mL · Unidades formadoras de placa por mL o por gramo

Rango de referencia

Se usa como indicador de eficacia de tratamiento: la reducción logarítmica es lo que importa

Norma que lo exige

Ley 24.051 de residuos peligrosos y su Decreto 831/93, Anexo II, niveles guía de calidad de agua, para uso recreativo y reutilización; Normativa de vuelco de efluentes: Resolución ADA 336/2003 en Buenos Aires y sus equivalentes provinciales; Ley 26.221 y Anexo A del ERAS en el área de AySAnorma internacional

Norma que describe la técnica

ISO 10705-2; APHA 9211 Dnorma internacional

Edición y vigencia de la norma

ISO 10705-2:2000, vigente

Volumen de muestra

100 mL a 1 L según la carga esperada

Conservación y transporte

Frasco estéril con tiosulfato si el agua está clorada, refrigerado a 4 °C y procesado dentro de las 24 horas; hasta 48 horas con refrigeración. No congelar: baja mucho la recuperación de fagos. La cepa hospedadora tiene que estar en fase exponencial de crecimiento en el momento de la siembra.

Límite de detección típico

1 UFP por volumen sembrado

Incertidumbre típica

Distribución de Poisson; se cuentan entre 20 y 200 placas de lisis por placa

Área

Aguas; Microbiología; Efluentes

Fecha de última actualización: 8/9/2026