Vigilancia epidemiológica basada en aguas residuales por RT-qPCR

Fundamento

Se toma una muestra compuesta de 24 horas en la boca de la colectora, proporcional al caudal. El virus o el marcador se concentra por precipitación con polietilenglicol o por adsorción a membranas, se extrae el ácido nucleico y se cuantifica por PCR en tiempo real o digital. La señal se normaliza por un marcador de aporte humano —el virus mosaico del pimiento o la creatinina— y por el caudal, para poder comparar días distintos y ciudades distintas.

Analito (qué se mide)

Marcadores de patógenos en aguas residuales

Matriz (en qué muestra)

Efluente cloacal crudo; boca de registro de colectora

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Muestreador automático refrigerado; centrífuga refrigerada de alta velocidad; termociclador en tiempo real o PCR digital; cabina de bioseguridad nivel 2; freezer a -80 °C.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Polietilenglicol y cloruro de sodio; kits de extracción; mezclas de RT-qPCR con sondas; controles de proceso y de inhibición.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Botellas del muestreador; tubos de centrífuga; tubos libres de nucleasas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Kits de extracción y de PCR; puntas con filtro.

Unidad

Copias genómicas por litro · Copias por habitante y por día · señal normalizada por marcador fecal

Rango de referencia

El valor absoluto importa menos que la tendencia: lo que se sigue es la curva a lo largo de las semanas para la misma cuenca

Norma que lo exige

Programas de vigilancia del Ministerio de Salud de la Nación y de las provincias; no hay una norma técnica nacional que lo reglamente todavíanorma internacional

Norma que describe la técnica

Guías de la OMS para la vigilancia ambiental de poliovirus; protocolos del Joint Research Centre de la Comisión Europea para SARS-CoV-2 en aguas residuales; ISO 15216-1 como base metodológicanorma internacional

Edición y vigencia de la norma

Guías de la OMS para vigilancia ambiental, revisión vigente

Volumen de muestra

Muestra compuesta de 24 horas, de 500 mL a 1 L, tomada con muestreador automático refrigerado

Conservación y transporte

La muestra compuesta de 24 horas es la que representa a la población; una muestra puntual de las 10 de la mañana solo representa a quienes usaron el baño a esa hora. El muestreador tiene que estar refrigerado a 4 °C durante toda la jornada. Se procesa dentro de las 24 horas o se congela a -80 °C. Se registra siempre el caudal, la población servida y si llovió, porque la lluvia diluye la señal y hace parecer que el brote bajó.

Límite de detección típico

1.000 a 10.000 copias por litro según el método de concentración

Incertidumbre típica

±30 a 50%; es una técnica de tendencia y no de valor absoluto, y así conviene informarla

Área

Aguas; Efluentes; Biología molecular

Fecha de última actualización: 8/9/2026