Alanina aminotransferasa en suero por método cinético con NADH a 340 nm

Fundamento

La alanina aminotransferasa vive dentro del hepatocito, en concentración muy superior a la del plasma; cuando la célula se daña y pierde integridad de membrana, la enzima se escapa a la sangre y su actividad sérica aumenta. La medición no determina cuánta proteína hay sino cuánto trabajo hace: se le ofrece a la enzima su par de sustratos, alanina y alfa-cetoglutarato, y se la deja transferir el grupo amino, lo que produce piruvato y glutamato. El piruvato no se mide directamente; se lo acopla a una segunda reacción, la que cataliza la lactato deshidrogenasa, que lo reduce a lactato consumiendo NADH. Y el NADH sí se ve: absorbe a 340 nanómetros y el NAD+ en que se convierte no lo hace. El instrumento sigue entonces la caída de absorbancia a 340 nanómetros a lo largo del tiempo, a treinta y siete grados, y la pendiente de esa caída es proporcional a la actividad enzimática de la muestra. De ahí que se hable de método cinético y no de punto final: el resultado sale de una velocidad, no de un color final. Los métodos de referencia agregan fosfato de piridoxal, que es el cofactor de la enzima, porque sin él una parte de las moléculas de la muestra está inactiva y el resultado queda por debajo del real; conviene saber si el laboratorio lo usa, porque los dos esquemas no dan el mismo número.

Analito (qué se busca)

Alanina aminotransferasa

Matriz (en qué muestra)

Suero de pacientes en estudio de enfermedad hepática; control de tratamientos con fármacos hepatotóxicos; tamizaje de hepatitis en el examen periódico de salud

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Autoanalizador de química clínica con lectura cinética a 340 nm y cubeta termostatizada a treinta y siete grados; centrífuga; baño o bloque térmico.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Reactivo bireactivo de alanina aminotransferasa con alanina, alfa-cetoglutarato, NADH y lactato deshidrogenasa; fosfato de piridoxal en los esquemas que lo incluyen; calibrador y material de control de dos niveles.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Cubetas de lectura; micropipetas; copas de muestra; registro de la pendiente y del tiempo de lectura.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Cubetas; puntas de pipeta; reactivos y controles.

Unidad

kat · U/L · µkat/L

Rango de referencia

El resultado con fosfato de piridoxal y el resultado sin él no son intercambiables, así que un seguimiento no se compara entre laboratorios que usan esquemas distintos. Ojo: una muestra hemolizada da valores falsamente altos, y el ejercicio intenso en los días previos sube la enzima sin que haya nada hepático

Norma que lo exige

Las normas de acreditación del laboratorio clínico y los programas de control de calidad externo en química clínica

Norma que describe la técnica

Los métodos de referencia de la Federación Internacional de Química Clínica y Medicina de Laboratorio para las enzimas séricas; los insertos de los reactivos comerciales, que declaran si el esquema lleva fosfato de piridoxal

Edición y vigencia de la norma

Métodos de referencia de la IFCC para enzimas en su edición vigente; insertos vigentes de los reactivos en uso

Volumen de muestra

De 3 a 5 mL de sangre en tubo seco con gel separador, que dan de 1 a 2 mL de suero

Conservación y transporte

El suero se separa del coágulo dentro de las dos horas de la extracción; separado, aguanta refrigerado unos días y congelado a veinte grados bajo cero varias semanas. La hemólisis es el problema serio de la preanalítica: el glóbulo rojo libera contenido intracelular y falsea el resultado, así que una muestra visiblemente hemolizada se vuelve a extraer en lugar de informarse con una nota.

Límite de detección típico

La actividad medible arranca en el orden de la unidad por litro, muy por debajo del valor de corte clínico

Incertidumbre típica

La repetibilidad entre corridas está en el orden de unas pocas unidades por ciento en el nivel de decisión

Área

Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 1/10/2026

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