Amonio en plasma por método enzimático con glutamato deshidrogenasa

Fundamento

El amonio proviene del catabolismo de los aminoácidos y de la actividad de la flora intestinal, y el hígado lo convierte en urea a través del ciclo de la ornitina. Cuando ese ciclo falla, sea por una insuficiencia hepática, por un cortocircuito portosistémico o por un error congénito de alguna de sus enzimas, el amonio se acumula y atraviesa la barrera hematoencefálica, donde produce edema y encefalopatía. En el recién nacido, una hiperamoniemia grave es una urgencia metabólica: el daño neurológico se relaciona con el tiempo que el amonio permanece alto, de modo que el valor del laboratorio decide la conducta en horas. El método más usado es enzimático: la glutamato deshidrogenasa cataliza la condensación del amonio con alfa-cetoglutarato usando NADPH como cofactor, y la caída de absorbancia a trescientos cuarenta nanómetros, proporcional al amonio presente, se lee en el mismo analizador de química clínica. Todo el ensayo está dominado por un problema: el amonio ambiental y el que generan las propias células de la muestra. La sangre debe extraerse sin torniquete prolongado y sin que el paciente cierre el puño, ir en hielo, centrifugarse en frío dentro de los quince minutos y separarse del sedimento, porque los eritrocitos contienen dos a tres veces más amonio que el plasma y lo liberan. El tabaquismo del operador, los guantes de látex empolvados y el amoníaco de los productos de limpieza contaminan la determinación hacia arriba.

Analito (qué se busca)

Amonio

Matriz (en qué muestra)

Plasma de pacientes con encefalopatía de causa no aclarada; recién nacidos con rechazo del alimento, vómitos y depresión del sensorio; seguimiento de la insuficiencia hepática

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Analizador de química clínica con lectura a trescientos cuarenta nanómetros; centrífuga refrigerada; baño de hielo; área de trabajo libre de vapores amoniacales.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Equipo enzimático con glutamato deshidrogenasa, alfa-cetoglutarato y NADPH; calibradores de amonio; controles de dos niveles; tubos con EDTA o heparina libres de amonio.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Muestra de plasma separada en frío; planilla con la calibración, los controles y el tiempo entre extracción y separación; datos clínicos: edad, sospecha de error congénito del metabolismo, función hepática y dieta proteica.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Equipos de reactivo; tubos; puntas; calibradores y controles.

Unidad

mol/m³ · µmol/L · edad del paciente, porque el valor de referencia del recién nacido es más alto · tiempo entre extracción y centrifugación · hemólisis de la muestra

Rango de referencia

Casi todos los valores falsamente altos son preanalíticos: torniquete prolongado, puño cerrado, demora en centrifugar o muestra hemolizada. Antes de tratar una hiperamoniemia inesperada conviene repetir la extracción cuidando esas cuatro cosas

Norma que lo exige

Los protocolos de urgencia metabólica neonatal de los servicios de neonatología y de errores congénitos del metabolismo; las guías de manejo de la encefalopatía hepática; las normas de acreditación del laboratorio clínico

Norma que describe la técnica

Los métodos enzimáticos de referencia para amonio en plasma; las instrucciones de uso del equipo comercial; los procedimientos del laboratorio

Edición y vigencia de la norma

Instrucciones de uso vigentes del equipo enzimático comercial

Volumen de muestra

De 0,5 a 1 mL de plasma

Conservación y transporte

El tubo va en hielo desde la extracción, se centrifuga en frío dentro de los quince minutos y el plasma se separa enseguida; si no se mide en el momento, se congela. El amonio del plasma sube de forma medible en minutos a temperatura ambiente.

Límite de detección típico

Del orden de 5 a 10 µmol/L

Incertidumbre típica

Del 5 al 15 % relativo, mayor en valores bajos

Área

Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 23/9/2026