Anticuerpos anti ADN de doble cadena en suero

Fundamento

La inmunofluorescencia indirecta enfrenta el suero diluido del paciente a un sustrato celular fijado sobre un portaobjetos; si hay anticuerpos, se unen, y un antisuero humano marcado con fluoresceína los revela al microscopio de fluorescencia. El resultado se informa como título —la mayor dilución que todavía da señal— y como patrón de fluorescencia, que es lo que orienta el diagnóstico. Los anticuerpos contra el ADN de doble cadena son, al contrario de los antinucleares, muy específicos del lupus eritematoso sistémico, y además correlacionan con la actividad de la enfermedad y en particular con el compromiso renal, de modo que se usan para seguir al paciente y no sólo para diagnosticarlo. El método de inmunofluorescencia sobre Crithidia luciliae, un protozoo cuyo cinetoplasto contiene ADN de doble cadena puro, es el más específico porque no hay ADN de cadena simple que dé falsos positivos. Los inmunoensayos son más sensibles pero menos específicos, así que conviene saber con cuál se hizo.

Analito (qué se busca)

anticuerpos anti ADN de doble cadena

Matriz (en qué muestra)

Suero

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Microscopio de fluorescencia con objetivos de 20 y 40 aumentos y filtros para fluoresceína, idealmente con cámara y sistema de lectura asistida; procesador automático de portaobjetos; lector de microplacas o analizador de quimioluminiscencia; equipo de inmunoblot; incubadora húmeda.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Portaobjetos con células HEp-2, con neutrófilos y con Crithidia luciliae; conjugados anti inmunoglobulina humana marcados con fluoresceína; kits de ELISA, quimioluminiscencia o inmunoblot para cada especificidad; sueros control positivos de patrón conocido y negativos; medio de montaje.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Cubreobjetos; cámaras húmedas; micropipetas; tubos de dilución; microplacas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Portaobjetos; conjugados; kits; controles.

Unidad

1

Norma que lo exige

Las guías y los criterios de clasificación de las sociedades de reumatología (EULAR y ACR) para lupus, síndrome de Sjögren, esclerosis sistémica y vasculitis, que incorporan estos anticuerpos como criterios; las obras sociales y el sistema de medicamentos de alto costo, que exigen el resultado para autorizar tratamientos biológicos; los laboratorios se habilitan según la Ley 17.132; ISO 15189 y los programas de evaluación externa de la calidadnorma internacional

Norma que describe la técnica

Las recomendaciones del International Consensus on ANA Patterns para la nomenclatura y el informe de los patrones de inmunofluorescencia; el consenso internacional revisado sobre el ensayo de ANCA (Bossuyt y colaboradores, 2017), que recomienda el inmunoensayo específico como primera línea; las guías del Colegio Americano de Reumatología sobre el uso de ANA; ISO 15189norma internacional

Edición y vigencia de la norma

Consenso internacional de patrones ANA (ICAP, actualizado 2021); consenso revisado de ANCA (2017)

Volumen de muestra

1 a 2 mL de suero; se pide junto con el cuadro clínico, porque un ANA positivo sin síntomas no diagnostica nada

Conservación y transporte

El suero se conserva refrigerado hasta 72 horas y congelado para plazos mayores; los sueros lipémicos y hemolizados dan fondo en la inmunofluorescencia. La lectura del patrón exige un observador entrenado y control con sueros de patrón conocido en cada corrida, y la concordancia entre observadores es la limitación del método, por eso se informa con la nomenclatura internacional. Un ANA positivo aislado no es diagnóstico: se informa siempre con título, patrón y método, y se interpreta con la clínica y con los anticuerpos específicos.

Límite de detección típico

Título de 1:40 a 1:80 según el punto de corte del laboratorio

Área

Clínico/bioquímico; Biología molecular

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Fecha de última actualización: 5/10/2026

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