Coloraciones histoquímicas especiales en anatomía patológica

Fundamento

Cada coloración explota una reacción química específica sobre el corte. El ácido peryódico de Schiff oxida los dioles vecinos de los polisacáridos y el aldehído resultante reacciona con el reactivo de Schiff dando color magenta, lo que revela glucógeno, membranas basales y paredes fúngicas; la digestión previa con diastasa distingue el glucógeno de lo demás. El tricrómico de Masson separa por tamaño molecular y carga los colorantes ácidos, tiñendo el colágeno de un color y el músculo y el citoplasma de otro, y es la base de la evaluación de fibrosis. La impregnación argéntica para retículo deposita plata metálica sobre las fibras de colágeno tipo tres, mostrando la trama de sostén. El rojo Congo se une a la estructura beta plegada del amiloide y produce, bajo luz polarizada, una birrefringencia verde manzana que es el criterio diagnóstico. El azul de Prusia revela hierro férrico por formación de ferrocianuro férrico. El Ziehl Neelsen y sus variantes revelan micobacterias por su ácido alcohol resistencia, y el Grocott con metenamina de plata revela hongos. Cada técnica exige un control positivo conocido en el mismo portaobjetos o en paralelo, porque una coloración que falla se ve como un resultado negativo.

Matriz (en qué muestra)

Cortes de tejido incluido en parafina y por congelación; biopsias hepáticas, renales y de médula ósea; tejido con sospecha de depósito de amiloide, hierro o glucógeno; muestras con sospecha de micosis o de micobacterias

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Coloreador automático o batería de cubetas; estufa; microscopio con luz polarizada y filtros; campana de extracción; baño termostático; micrótomo para los cortes seriados.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Ácido peryódico y reactivo de Schiff; diastasa; colorantes del tricrómico; soluciones de impregnación argéntica; rojo Congo; ferrocianuro de potasio y ácido clorhídrico; fucsina fenicada; metenamina de plata; medios de montaje.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Portaobjetos y cubreobjetos; cubetas de coloración; pinzas; controles positivos en bloque; gradillas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Reactivos y colorantes; portaobjetos; guantes; medio de montaje.

Unidad

1 · resultado de cada coloración con su control · birrefringencia verde manzana presente o ausente · grado de fibrosis según la escala aplicada · hierro tisular semicuantificado

Rango de referencia

El resultado es morfológico y se informa según la escala de cada entidad; la validez depende de que el control positivo haya coloreado correctamente en la misma tanda

Norma que lo exige

Las normas de habilitación de servicios de anatomía patológica; los estándares de acreditación de laboratorios de patología, que exigen controles adecuados en cada técnica; las guías diagnósticas de las sociedades de patología para cada entidad; las normas de higiene y seguridad por el manejo de plata, ácidos y colorantes

Norma que describe la técnica

Los manuales de técnicas histoquímicas y los procedimientos normalizados de las sociedades de patología; las guías diagnósticas específicas, como las de amiloidosis y de patología hepática y renal; los procedimientos validados del servicio con sus controles

Edición y vigencia de la norma

Manuales de técnicas histoquímicas vigentes; guías diagnósticas de las sociedades de patología vigentes

Volumen de muestra

Destructivo en los cortes usados; el taco permite repetir

Conservación y transporte

Los cortes se hacen y se colorean idealmente el mismo día, porque las secciones guardadas al aire pierden reactividad en varias técnicas, sobre todo en las argénticas. Los reactivos plateados son inestables y se preparan frescos. El control positivo se corre siempre y se archiva junto con la muestra, ya que sin él un negativo no significa nada. Los residuos con plata y con colorantes se recogen por separado y se gestionan como residuos peligrosos. Los preparados coloreados se archivan por el plazo legal, protegidos de la luz, que decolora varias tinciones.

Límite de detección típico

Depende de la técnica: el Ziehl detecta micobacterias a partir de una carga alta, muy por encima del cultivo

Incertidumbre típica

Resultado cualitativo interpretado por el patólogo; la reproducibilidad se sostiene en los controles y en la estandarización de tiempos y reactivos

Área

Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 10/9/2026