Descalcificación de tejidos óseos y su efecto sobre los estudios inmunohistoquímicos y moleculares

Fundamento

La descalcificación disuelve las sales de calcio del tejido ya fijado. Los ácidos fuertes, como el clorhídrico o el nítrico, son rápidos —horas— pero hidrolizan los ácidos nucleicos y desnaturalizan antígenos, y dejan el material inservible para técnicas moleculares. Los ácidos débiles, como el fórmico, son más lentos y bastante más benignos. Los agentes quelantes, en especial el ácido etilendiaminotetraacético a pH neutro, secuestran el calcio sin atacar las proteínas ni el ADN, preservan la inmunorreactividad y la integridad molecular, pero tardan días o semanas, tiempo que en un diagnóstico oncológico muchas veces no se tiene. La decisión se toma según el caso, y el descalcificador usado se declara en el informe, porque condiciona la interpretación de todo lo que venga después. El punto final se controla por punción con aguja, que es el método más burlo, por medición del calcio en la solución, que es objetivo y evita la sobredescalcificación, o por radiografía de la pieza, que es el más confiable en piezas grandes. Pasarse de tiempo es tan dañino como no llegar: el tejido sobredescalcificado se colorea mal, pierde afinidad por la hematoxilina y se desgarra al cortar. Después de descalcificar hay que lavar a fondo para eliminar el ácido residual.

Matriz (en qué muestra)

Biopsias de médula ósea; piezas óseas y de partes blandas con calcificación; dientes y maxilares; metástasis óseas; tejido con osificación heterotópica; material que requiere estudios moleculares posteriores

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Agitador orbital o descalcificador con agitación y control de temperatura; equipo de radiografía de piezas o acceso a él; analizador de calcio; micrótomo; estufa; campana de extracción.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Ácido fórmico; solución de ácido etilendiaminotetraacético a pH neutro; ácidos fuertes para casos que no requieren estudios posteriores; reactivos de determinación de calcio; formol tamponado.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Recipientes con volumen amplio; casetes; agujas para el control por punción; pinzas; malla de sostén.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Reactivos descalcificadores; casetes; guantes; recipientes.

Unidad

s · agente descalcificador y su concentración · tiempo de descalcificación (h) · método de control del punto final · resultado de las técnicas posteriores · declaración del método en el informe

Rango de referencia

El ácido etilendiaminotetraacético preserva antígenos y ácidos nucleicos y es el exigido cuando hay que hacer estudios predictivos o moleculares; los ácidos fuertes se reservan para casos donde solo se necesita morfología

Norma que lo exige

Las guías de las sociedades de patología sobre manejo de biopsias óseas y de médula ósea y sobre variables preanalíticas que afectan a los estudios moleculares; los estándares de acreditación de laboratorios de patología, que exigen declarar el método de descalcificación; las guías de biomarcadores predictivos, que restringen los métodos admisibles; las normas de higiene y seguridad por el uso de ácidos

Norma que describe la técnica

Los manuales de técnica histológica sobre descalcificación y control de punto final; las guías internacionales sobre biomarcadores que especifican qué descalcificadores son aceptables para determinaciones predictivas; las recomendaciones de las sociedades de hematopatología sobre biopsia de médula ósea

Edición y vigencia de la norma

Guías internacionales sobre variables preanalíticas y biomarcadores vigentes; manuales de técnica histológica vigentes

Volumen de muestra

Destructivo. La pieza descalcificada no vuelve atrás

Conservación y transporte

La fijación debe estar completa antes de descalcificar; si se descalcifica tejido mal fijado, el ácido macera lo que quedaba. El volumen de solución tiene que ser amplio y renovarse, porque se agota. El punto final se controla de manera activa y frecuente: la sobredescalcificación es irreversible y arruina tanto la coloración como los estudios posteriores. Tras el proceso se lava a fondo, ya que el ácido residual sigue actuando dentro del casete y del taco. En casos oncológicos conviene separar de antemano una porción no descalcificada, cuando la hay, para reservarla a los estudios moleculares.

Límite de detección típico

No aplica: es un proceso de preparación

Incertidumbre típica

No aplica; la calidad se evalúa por el resultado de la coloración y por el desempeño de las técnicas posteriores

Área

Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 10/9/2026