Determinación de biomarcadores predictivos por inmunohistoquímica y su interpretación

Fundamento

La técnica es la inmunohistoquímica, pero lo específico es el rigor del ensayo y de la lectura. Los receptores hormonales se informan como porcentaje de núcleos tumorales marcados y por la intensidad, con un umbral de positividad definido por consenso; la lectura se hace sobre el tumor invasor y no sobre el carcinoma in situ ni sobre el epitelio normal, que sirve de control interno. El marcador de sobreexpresión de receptores de crecimiento se puntúa por la completitud e intensidad de la marcación de membrana y por el porcentaje de células, con una escala de cuatro categorías, y las categorías intermedias obligan a un estudio complementario de amplificación génica por hibridación in situ. Los marcadores para inmunoterapia se informan como proporción de células tumorales marcadas o como una puntuación combinada que incluye células inmunes, y cada fármaco tiene su clon de anticuerpo, su plataforma y su punto de corte validados, que no son intercambiables. Los marcadores de inestabilidad de microsatélites se evalúan por la pérdida de expresión nuclear de las proteínas reparadoras, con control interno obligatorio en linfocitos y estroma. La lectura se apoya en criterios escritos, se documenta con imágenes y en varios marcadores se recomienda revisión por un segundo observador o análisis de imagen asistido.

Matriz (en qué muestra)

Biopsias y piezas de carcinoma de mama, de pulmón, gástrico y colorrectal; ganglios y metástasis; citoblocks; material de archivo para revisión; casos derivados para segunda opinión

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Plataforma automatizada de tinción; microscopio con cámara; escáner de preparados y software de análisis de imagen; equipo de hibridación in situ; olla de recuperación antigénica; estufa.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Anticuerpos de los clones validados para cada marcador; sistemas de detección; sondas de hibridación in situ; controles externos con expresión conocida y de baja expresión; reactivos de recuperación.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Portaobjetos cargados; controles en bloque; cubreobjetos; planillas de lectura; imágenes de referencia.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Anticuerpos y sondas; portaobjetos; reactivos; guantes.

Unidad

1 · porcentaje de células marcadas e intensidad · puntuación del marcador de membrana (0 a 3+) · relación de señales en la hibridación in situ · puntuación combinada para inmunoterapia · clon, plataforma y punto de corte usados

Rango de referencia

Cada marcador tiene su umbral definido por consenso, y el informe debe declarar el clon, la plataforma y el criterio aplicado, porque un mismo tumor puede clasificarse distinto con otro ensayo

Norma que lo exige

Las guías de las sociedades de patología y de oncología que normatizan la determinación e informe de cada biomarcador predictivo; los estándares de acreditación de laboratorios de patología, con exigencias específicas para marcadores predictivos; las disposiciones de la autoridad regulatoria sobre los productos de diagnóstico in vitro asociados a un fármaco; los requisitos de cobertura que condicionan la indicación al resultado

Norma que describe la técnica

Las guías conjuntas de las sociedades internacionales de patología y oncología sobre determinación de receptores hormonales, de sobreexpresión y amplificación de receptores de crecimiento y de marcadores para inmunoterapia, con sus criterios preanalíticos, sus controles y sus puntos de corte; los programas de evaluación externa específicos

Edición y vigencia de la norma

Guías internacionales sobre biomarcadores predictivos vigentes; estándares de acreditación de laboratorios de patología vigentes

Volumen de muestra

Destructivo en los cortes usados; se preserva material del bloque para estudios posteriores

Conservación y transporte

Las variables preanalíticas están normatizadas y forman parte del informe: el tiempo de isquemia fría debe ser corto y el de fijación en formol tamponado debe caer dentro de la ventana establecida, porque fuera de ella el resultado no es válido y así hay que declararlo. Los cortes no se guardan cortados: se hacen y se procesan en el momento. Cada corrida lleva un control externo de expresión conocida y otro de baja expresión, que es el que detecta una pérdida de sensibilidad. Los casos con resultado en zona límite se revisan y, cuando corresponde, se derivan a un método complementario.

Límite de detección típico

No aplica: la lectura es semicuantitativa sobre un umbral definido

Incertidumbre típica

La concordancia entre observadores es una limitación conocida, sobre todo en las categorías intermedias; se mitiga con criterios escritos, imágenes de referencia, doble lectura y análisis de imagen

Área

Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 10/9/2026