Determinación del grupo sanguíneo ABO y del factor Rh D por prueba directa e inversa

Fundamento

El sistema ABO tiene una particularidad que ningún otro grupo sanguíneo tiene: las personas producen de manera natural anticuerpos contra los antígenos que no poseen. Eso permite una verificación cruzada. La prueba directa o globular enfrenta los glóbulos rojos del paciente con antisueros conocidos anti A, anti B y anti AB, y se observa la aglutinación. La prueba inversa o sérica enfrenta el suero o el plasma del paciente con glóbulos rojos de grupo conocido A1 y B, y se observa qué aglutina; el resultado debe ser el complemento exacto del anterior, y cualquier discordancia entre ambas obliga a investigar antes de informar. El factor Rh D se determina con antisuero anti D, con un control paralelo para descartar autoaglutinación, y ante un resultado negativo en un donante se investiga el D débil por la técnica de antiglobulina, porque un donante D débil informado como negativo puede inmunizar a una receptora. Las técnicas actuales usan tarjetas de gel o microplacas con centrifugación, que estandarizan la lectura y dejan registro fotográfico, en lugar del tubo tradicional. Las discordancias más frecuentes se deben a subgrupos débiles de A, a anticuerpos fríos, a hipogammaglobulinemia en el recién nacido y al paciente politransfundido.

Matriz (en qué muestra)

Sangre entera con anticoagulante de donante y de receptor; muestras de cordón umbilical; muestras de embarazadas; sangre de pacientes politransfundidos; muestras de urgencia

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Centrífuga serológica; sistema de tarjetas de gel con su centrífuga e incubadora, o procesador automatizado de inmunohematología; microscopio; baño termostático; heladera de reactivos con registro de temperatura; agitador.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Antisueros monoclonales anti A, anti B, anti AB y anti D con su control; suspensiones de glóbulos rojos A1 y B de reactivo; solución de lavado; suero antiglobulina humana; células control de Coombs.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tubos de hemólisis; tarjetas de gel; micropipetas; gradillas; pipetas Pasteur; portaobjetos.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Tarjetas de gel; reactivos; puntas de pipeta; guantes; tubos.

Unidad

1 · grupo ABO informado · Rh D positivo o negativo · concordancia entre prueba directa e inversa · intensidad de la aglutinación (0 a 4+)

Rango de referencia

El resultado es categórico y solo se informa cuando la prueba directa y la inversa concuerdan; toda discordancia se estudia y se resuelve antes de emitir el informe, y mientras tanto el paciente se transfunde con glóbulos O

Norma que lo exige

La ley de sangre y su reglamentación, que establecen los estudios obligatorios de donantes y receptores; las normas técnicas del programa nacional de sangre y las de las autoridades sanitarias provinciales sobre servicios de hemoterapia; los estándares de acreditación de bancos de sangre; los protocolos institucionales de seguridad transfusional

Norma que describe la técnica

Las normas técnicas nacionales de hemoterapia sobre determinación de grupo sanguíneo; los estándares internacionales de bancos de sangre y servicios de transfusión; los manuales técnicos de las asociaciones de bancos de sangre; los procedimientos validados del servicio y las instrucciones de uso de los reactivos

Edición y vigencia de la norma

Ley de sangre y normas técnicas nacionales de hemoterapia vigentes; estándares internacionales de bancos de sangre vigentes

Volumen de muestra

Destructivo en la porción usada. Un tubo de 4 a 6 mL de sangre con anticoagulante alcanza para el estudio completo

Conservación y transporte

La muestra se identifica al lado del paciente y en el momento de la extracción, con dos identificadores y la firma de quien extrae: el error de identificación de la muestra, y no el del laboratorio, es la causa principal de las transfusiones incompatibles. Se conserva refrigerada de 2 a 8 °C y tiene una validez corta, en general de tres días para pruebas pretransfusionales si el paciente fue transfundido o estuvo embarazado en los últimos tres meses. Los reactivos se guardan a la temperatura indicada y se controlan a diario con células de reactividad conocida.

Límite de detección típico

No aplica: es una determinación cualitativa de aglutinación

Incertidumbre típica

El resultado es categórico; su confiabilidad se sostiene en la doble prueba concordante y en el control diario de los reactivos

Área

Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 10/9/2026