Determinación semicuantitativa de plaguicidas clorados y tiofosforados por cromatografía en capa delgada

Fundamento

El extracto purificado se siembra en una placa recubierta con una capa fina de adsorbente, junto con patrones de los plaguicidas buscados, y se desarrolla en una cuba con un solvente que asciende por capilaridad arrastrando a los compuestos a distintas alturas según su reparto entre el adsorbente y el solvente. Terminado el desarrollo, la placa se revela con un reactivo específico: los organoclorados se detectan por reacciones que liberan cloruro y lo revelan, o por su efecto sobre una capa impregnada con sales de plata expuesta a la luz, que produce manchas oscuras sobre fondo claro; los tiofosforados se revelan por su inhibición de la colinesterasa, una técnica ingeniosa en la que la placa se rocía con la enzima y un sustrato cromogénico y las manchas aparecen como zonas claras donde la enzima quedó inhibida, lo que además aporta información toxicológica directa. La identificación se hace por la posición relativa de la mancha respecto del frente de solvente y comparada con los patrones, y la estimación de la cantidad, por comparación visual del tamaño y la intensidad de la mancha con una serie de patrones de concentración creciente, de donde surge el carácter semicuantitativo; el valor de referencia asociado normaliza esa comparación.

Analito (qué se mide)

Plaguicidas clorados y tiofosforados en extractos de alimentos

Matriz (en qué muestra)

Extractos de alimentos en tamizaje de residuos; muestras en laboratorios sin cromatógrafo de gases disponible; confirmación de identidad de hallazgos; muestras de investigación de intoxicaciones

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cubas de desarrollo; sembradores y aplicadores de muestra; placas con adsorbente; lámpara ultravioleta; cámara de revelado y pulverizadores; estufa de activación de placas; densitómetro de placas cuando se dispone.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Placas de sílica gel y de alúmina; solventes de desarrollo; reactivos de revelado: sales de plata, enzima colinesterasa y sustratos cromogénicos; patrones certificados de plaguicidas; solventes de calidad para residuos.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Capilares y jeringas de siembra; planillas con las posiciones relativas y las intensidades; registro fotográfico de las placas; patrones de concentración creciente.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Placas; solventes; enzimas y reactivos de revelado; patrones.

Unidad

mg/kg · posición relativa de cada mancha respecto del frente de solvente · identificación por comparación con los patrones sembrados en la misma placa · estimación semicuantitativa por comparación de tamaño e intensidad · reactivo de revelado empleado · registro fotográfico de la placa

Rango de referencia

La técnica es semicuantitativa y su alcance es del orden de fracciones de miligramo por kilogramo, insuficiente para verificar los límites máximos actuales, que son mucho más bajos; sirve como tamizaje y como identificación independiente, y todo hallazgo se confirma y se cuantifica por cromatografía instrumental

Norma que lo exige

El Código Alimentario y las resoluciones sobre límites máximos de residuos, en los programas que admiten el tamizaje previo; los protocolos de laboratorios de toxicología para la investigación de intoxicaciones agudas; los programas de vigilancia con recursos limitados; las normas de acreditación del laboratorionorma argentina

Norma que describe la técnica

IRAM 23018, que fija el método de determinación semicuantitativa de residuos de plaguicidas clorados por cromatografía en capa delgada; IRAM 23017, sobre el valor de referencia empleado en esa determinación semicuantitativa; IRAM 23020, sobre la determinación semicuantitativa de residuos de plaguicidas tiofosforados por capa delgada; IRAM 23011-1, sobre la purificación de los extractosnorma argentina

Edición y vigencia de la norma

IRAM 23018:1972; IRAM 23017:1974; IRAM 23020:1972; IRAM 23011-1:1970

Volumen de muestra

Destructivo. Unos microlitros de extracto por siembra

Conservación y transporte

Los patrones se siembran en la misma placa que la muestra y no en otra, porque la posición relativa depende de la placa, del solvente y de la humedad del ambiente, y comparar entre placas es la fuente principal de identificaciones equivocadas. El revelado enzimático se hace con enzima activa y verificada, dado que una enzima degradada no produce contraste. La placa se fotografía en el momento, ya que las manchas se desvanecen.

Límite de detección típico

Del orden de décimas de miligramo por kilogramo según el revelado, holgadamente por encima de los límites actuales

Incertidumbre típica

La estimación semicuantitativa tiene incertidumbre de un factor; todo resultado positivo se confirma

Área

Química analítica; Toxicología; Alimentos y bebidas

Fecha de última actualización: 11/9/2026