Ensayo de micronúcleos con bloqueo de la citocinesis

Fundamento

Se cultivan linfocitos con citocalasina B, que impide la división citoplasmática y deja células binucleadas; los fragmentos cromosómicos o cromosomas enteros que no se incorporaron a los núcleos hijos aparecen como micronúcleos y se cuentan al microscopio.

Matriz (en qué muestra)

Linfocitos / células exfoliadas

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Estufa de CO2 37 °C; campana de flujo laminar; centrífuga; microscopio óptico o de fluorescencia.

Proveedores de Estufas, muflas y hornos · Centrífugas · Microscopía.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Medio de cultivo con suero; fitohemaglutinina; citocalasina B; solución hipotónica; fijador Carnoy; Giemsa o DAPI.

Proveedores de Cultivo y microbiología.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Frascos de cultivo; portaobjetos; tubos.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios; portaobjetos.

Unidad

1 · Micronúcleos por 1000 células binucleadas · Índice de división nuclear

Rango de referencia

Se compara con el valor basal de la población de referencia

Norma que describe la técnica

OCDE 487

Edición y vigencia de la norma

Guías de ensayo de la OCDE, de revisión periódica por número. Son las que aceptan las autoridades regulatorias de la mayoría de los países para ensayos de toxicidad; se descargan sin cargo del sitio de la OCDE, que marca cuáles fueron reemplazadas.

Volumen de muestra

3 a 5 mL de sangre con heparina de sodio

Conservación y transporte

Temperatura ambiente, sembrada dentro de las 24 horas. Los linfocitos tienen que llegar vivos y capaces de dividirse: no refrigerar ni congelar.

Límite de detección típico

Se cuentan 1.000 a 2.000 células binucleadas por punto

Incertidumbre típica

±20 a 30%; la frecuencia basal varía con la edad y el sexo

Área

Toxicología

Fecha de última actualización: 3/9/2026

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