Frotis de sangre periférica con coloración de May-Grünwald-Giemsa

Fundamento

Los contadores hematológicos automatizados cuentan y clasifican células por impedancia, dispersión de luz y citoquímica, con una precisión que ningún observador humano alcanza, pero trabajan con poblaciones y no con células individuales: no reconocen una célula que nunca vieron, y su respuesta ante lo anormal es levantar una alarma. El frotis de sangre periférica es lo que sigue a esa alarma. Una gota de sangre con EDTA se extiende sobre un portaobjetos con un ángulo y una velocidad que determinan el espesor, se seca al aire y se colorea con la técnica de May-Grünwald-Giemsa, que combina colorantes ácidos y básicos en medio alcohólico: la eosina tiñe de rosado los componentes básicos como la hemoglobina y los gránulos eosinófilos, y los azules de metileno tiñen de azul los ácidos, sobre todo los ácidos nucleicos del núcleo. La lectura se hace en la zona de monocapa, donde los eritrocitos apenas se tocan, y evalúa tres cosas: la serie roja, con su tamaño, su color, su forma y la presencia de inclusiones; la serie blanca, con el recuento diferencial y con la morfología de cada estirpe, incluida la aparición de células inmaduras o atípicas; y las plaquetas, su número estimado, su tamaño y la presencia de agregados, que son la causa más común de una plaquetopenia falsa. Además es el método que encuentra parásitos intraeritrocitarios —Plasmodium, Babesia, tripanosomas— que ningún contador detecta. Es un ensayo barato cuyo resultado depende por completo de quién mira: exige un observador entrenado y un extendido bien hecho.

Analito (qué se busca)

Eritrocitos; leucocitos; plaquetas; parásitos intraeritrocitarios

Matriz (en qué muestra)

Sangre entera con EDTA de pacientes con alarmas en el hemograma automatizado; estudio de anemias, citopenias y leucocitosis; sospecha de leucemia; búsqueda de parásitos en sangre

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Microscopio óptico binocular con objetivos de 10x, 40x y 100x de inmersión; coloreador automático de extendidos o cubetas de coloración; contador manual de fórmula leucocitaria; extendedor automático de frotis si se dispone.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Colorante de May-Grünwald; colorante de Giemsa; buffer de fosfatos de pH controlado; metanol para la fijación; aceite de inmersión; xilol o sustituto para la limpieza.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Sangre entera con EDTA; portaobjetos limpios y desengrasados; planilla con el recuento diferencial, la descripción morfológica de las tres series y las observaciones; el hemograma automatizado del mismo tubo con sus alarmas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Portaobjetos; colorantes; aceite de inmersión.

Unidad

Ninguna · recuento diferencial leucocitario en porcentaje y en valor absoluto · descripción de la serie roja: anisocitosis, poiquilocitosis, hipocromía, policromatofilia, inclusiones · estimación y morfología plaquetaria · presencia de células inmaduras o atípicas · hallazgo de parásitos

Rango de referencia

El resultado depende del observador y del extendido: una monocapa mal hecha concentra los leucocitos grandes en la cola y falsea la fórmula. Los agregados plaquetarios por EDTA son la causa más frecuente de plaquetopenia que no existe

Norma que lo exige

Los criterios de revisión de extendidos que cada laboratorio define a partir de las alarmas y de los valores del contador; las guías de diagnóstico de anemias y de neoplasias hematológicas; los protocolos de vigilancia de paludismo y de enfermedad de Chagas aguda; las normas de acreditación del laboratorio clínico

Norma que describe la técnica

Las recomendaciones internacionales sobre nomenclatura morfológica y sobre criterios de revisión de frotis; los manuales de procedimientos de hematología; los procedimientos del laboratorio

Edición y vigencia de la norma

Procedimientos de hematología vigentes del laboratorio, con sus criterios de revisión de extendidos

Volumen de muestra

Una gota de sangre con EDTA; de 2 a 3 mL en el tubo

Conservación y transporte

El extendido se hace dentro de las dos a cuatro horas de la extracción: el EDTA prolongado deforma los leucocitos, vacuola los monocitos y hace irreconocibles algunas alteraciones. Los portaobjetos coloreados se guardan protegidos de la luz y del polvo.

Límite de detección típico

Se informa la presencia de una célula anormal en el campo examinado; para parásitos, del orden de 50 a 100 parásitos por microlitro en el frotis fino

Incertidumbre típica

El recuento diferencial manual sobre cien células tiene una imprecisión estadística alta en las poblaciones minoritarias

Área

Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 23/9/2026