Homocisteína total en plasma por cromatografía líquida o inmunoensayo

Fundamento

La homocisteína es un aminoácido azufrado que no viene de la dieta sino del metabolismo de la metionina, y tiene dos salidas: la remetilación de vuelta a metionina, que necesita folato y vitamina B12, y la transulfuración hacia cisteína, que necesita vitamina B6. Si cualquiera de esas vías falla, por déficit vitamínico o por una variante enzimática como la de la metilentetrahidrofolato reductasa, la homocisteína se acumula en sangre. En el plasma circula en su mayor parte unida a proteínas por puentes disulfuro y también como dímeros, de modo que lo que se informa es la homocisteína total: el primer paso del análisis es siempre una reducción con un agente como el tris-carboxietilfosfina o el ditiotreitol, que libera todas las formas antes de medirlas. La determinación se hace por cromatografía líquida con detección fluorimétrica previa derivatización, por cromatografía acoplada a espectrometría de masas, o por inmunoensayo competitivo en analizadores automatizados, que es la vía más difundida. El punto crítico del ensayo no está en la medición sino en la muestra: los glóbulos rojos siguen produciendo homocisteína después de la extracción y la vuelcan al plasma, a razón de alrededor de un diez por ciento por hora a temperatura ambiente, así que el tubo debe ir en hielo y centrifugarse dentro de la hora. Valores muy altos, por encima de cien micromoles por litro, apuntan a homocistinuria clásica y no a un déficit vitamínico.

Analito (qué se busca)

Homocisteína total

Matriz (en qué muestra)

Plasma de pacientes con trombosis venosa o arterial a edad temprana; estudio de déficit de vitamina B12 o de folato; pesquisa de homocistinuria

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafo líquido con detector de fluorescencia o espectrómetro de masas, o analizador de inmunoensayo automatizado; centrífuga refrigerada; baño de hielo para el transporte.

Proveedores de Centrífugas · Cromatografía líquida (HPLC/UPLC) · Espectrometría de masas.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Agente reductor; reactivo de derivatización para la detección fluorimétrica; patrones de homocisteína; equipos comerciales de inmunoensayo con sus calibradores; materiales de control de dos niveles.

Proveedores de Reactivos y solventes.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Muestra de plasma con EDTA separada en frío; planilla con la calibración, los controles y el tiempo transcurrido entre extracción y centrifugación; datos del paciente: estado vitamínico, función renal, tabaquismo y medicación.

Proveedores de Metrología y calibración.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Reactivos; columnas; viales; tubos; puntas.

Proveedores de Reactivos y solventes · Micropipetas y puntas.

Unidad

mol/m³ · µmol/L · estado de folato y de vitamina B12 del paciente · función renal · tiempo entre extracción y centrifugación · genotipo de metilentetrahidrofolato reductasa cuando se estudió

Rango de referencia

La muestra que se deja a temperatura ambiente sube alrededor de un 10 % por hora: un plasma separado dos horas después de la extracción convierte un valor normal en uno elevado y manda a estudiar una trombofilia que no existe

Norma que lo exige

Las guías de estudio de la trombofilia y del riesgo cardiovascular; los programas de pesquisa de errores congénitos del metabolismo, para la homocistinuria; las normas de acreditación del laboratorio clínico

Norma que describe la técnica

Los métodos de referencia publicados para homocisteína total en plasma; las instrucciones de uso del equipo comercial cuando se usa inmunoensayo; los procedimientos del laboratorio

Edición y vigencia de la norma

Procedimientos vigentes del laboratorio, o las instrucciones de uso del equipo comercial en su versión vigente

Volumen de muestra

De 0,5 a 1 mL de plasma

Conservación y transporte

El tubo se coloca en hielo apenas se extrae y se centrifuga dentro de la hora; separado del coágulo, el plasma es estable varios días refrigerado y meses congelado. Hay tubos con inhibidores del metabolismo eritrocitario que permiten estirar ese plazo, y conviene usarlos si la muestra viaja.

Límite de detección típico

Del orden de 0,5 a 1 µmol/L

Incertidumbre típica

Del 5 al 10 % relativo

Área

Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 23/9/2026

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