Método Coomassie Brilliant Blue G-250 (Bradford), absorbancia 595 nm

Fundamento

El colorante Coomassie G-250 se une a las proteínas y desplaza su absorbancia a 595 nm; la señal es proporcional a la concentración de proteína.

Analito (qué se mide)

Proteínas

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Espectrofotómetro UV-Vis (595 nm).

Reactivos¿Dónde lo compro?

Reactivo de Bradford (Coomassie G-250); estándar de proteína (BSA).

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Cubetas; material volumétrico.

Unidad

mg/mL · mL/g

Edición y vigencia de la norma

Esta técnica no responde a una norma única: se aplica con procedimientos internos validados por cada laboratorio, o forma parte de un método más amplio que sí tiene norma. Si el resultado va a usarse con fines regulatorios o legales, hay que acordar de antemano el procedimiento y su validación.

Volumen de muestra

10 a 50 µL de extracto por pocillo, por duplicado

Conservación y transporte

Extracto congelado a −70 °C. El Bradford se lee entre 5 y 20 minutos después de agregar el reactivo: antes o después, el color cambia.

Límite de detección típico

1 a 20 µg/mL de proteína

Incertidumbre típica

±5 a 10%; el método responde distinto según la proteína, así que el patrón importa

Área

Clínico/bioquímico; Biología molecular

Fecha de última actualización: 3/9/2026