Pesquisa neonatal en gota de sangre seca: hipotiroidismo, fenilcetonuria, fibrosis quística y otras enfermedades congénitas

Fundamento

Entre las 48 horas y el quinto día de vida se punza el talón del bebé y se dejan caer gotas de sangre sobre los círculos de una tarjeta de papel de filtro de calidad controlada, que se seca al aire y se envía al laboratorio de pesquisa. De cada círculo se troquelan discos de 3 mm que contienen un volumen reproducible de sangre y se eluyen. La tirotrofina, la 17-hidroxiprogesterona y la tripsina inmunorreactiva se determinan por inmunoensayo fluorométrico o quimioluminiscente en microplaca; la fenilalanina, por fluorometría o por espectrometría de masas en tándem; la biotinidasa, por un ensayo enzimático colorimétrico; la galactosa total y la galactosa-1-fosfato uridiltransferasa, por métodos enzimáticos y fluorométricos. La espectrometría de masas en tándem con dilución isotópica, a partir de un solo disco, cuantifica en dos minutos decenas de aminoácidos y acilcarnitinas y permite ampliar el panel a los errores congénitos del metabolismo. Los valores se comparan con puntos de corte establecidos por el programa, ajustados por edad al momento de la toma, peso al nacer y prematurez, que se fijan con alta sensibilidad a costa de falsos positivos; toda muestra sobre el punto de corte se repite por duplicado en la misma tarjeta y, si persiste, se cita al bebé para una muestra de suero y el estudio confirmatorio. El programa mide su desempeño por la cobertura, la edad al primer resultado y la tasa de recitación.

Analito (qué se busca)

Tirotrofina; Fenilalanina; 17-hidroxiprogesterona; Tripsina inmunorreactiva; Biotinidasa; Galactosa; Aminoácidos y acilcarnitinas

Matriz (en qué muestra)

Sangre entera de talón del recién nacido secada en papel de filtro

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Troqueladora de discos de 3 mm; lectores de fluorescencia y de quimioluminiscencia para microplaca; espectrómetro de masas en tándem con cromatografía líquida o con inyección directa; agitadores e incubadoras de microplacas; sistema informático de gestión del programa con seguimiento de cada recién nacido.

Proveedores de Baños, agitación y homogeneización · Espectrometría de masas.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Kits de inmunoensayo en gota de sangre seca para cada analito con sus calibradores en matriz de sangre seca; patrones internos deuterados de aminoácidos y acilcarnitinas; controles de calidad en sangre seca de los programas internacionales; solventes de grado espectrometría de masas.

Proveedores de Reactivos y solventes · Espectrometría de masas.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tarjetas de papel de filtro de grado pesquisa (S&S 903 o equivalente) con datos del recién nacido; lancetas de talón; microplacas; puntas con filtro; sobres y bolsas con desecante para el envío.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Tarjetas; kits; patrones; controles; microplacas.

Unidad

kg/m³ · µU/mL de tirotrofina · mg/dL de fenilalanina · ng/mL de 17-hidroxiprogesterona y de tripsina inmunorreactiva · µmol/L de aminoácidos y acilcarnitinas

Rango de referencia

Puntos de corte del orden de 10 µU/mL para tirotrofina, 2 a 2,5 mg/dL para fenilalanina y 60 a 70 ng/mL para tripsina inmunorreactiva, ajustados por cada programa; la incidencia conjunta de las enfermedades pesquisadas es de alrededor de 1 en 1.300 nacimientos

Norma que lo exige

Ley 23.413 y sus ampliatorias 23.874 y 24.438, que obligan a la pesquisa de fenilcetonuria, hipotiroidismo congénito, fibrosis quística, galactosemia, hiperplasia suprarrenal congénita y deficiencia de biotinidasa en todos los recién nacidos; Ley 26.279, que establece el régimen de detección y tratamiento de las patologías del recién nacido y su cobertura obligatoria; las normas del Programa Nacional de Fortalecimiento de la Detección Precoz de Enfermedades Congénitas del Ministerio de Salud; los programas provincialesnorma internacional

Norma que describe la técnica

Las guías del Programa Nacional del Ministerio de Salud para la pesquisa neonatal; CLSI NBS01 para la toma y el manejo de las muestras de sangre en papel de filtro; CLSI NBS04 para el uso de espectrometría de masas en tándem en pesquisa neonatal; las recomendaciones de la Sociedad Internacional de Pesquisa Neonatal; ISO 15189norma internacional

Edición y vigencia de la norma

CLSI NBS01, 7.ª edición (2021); CLSI NBS04, 2.ª edición (2017)

Volumen de muestra

Una tarjeta con los círculos llenos por completo, del orden de 4 a 5 gotas de sangre de talón, tomada entre las 48 horas y el quinto día de vida

Conservación y transporte

La calidad de la gota manda: un círculo con sangre aplicada en dos capas, una gota que no traspasó el papel o una tarjeta puesta a secar apoyada sobre una superficie da resultados falsos y hay que repetir la punción. Se seca en posición horizontal al aire, a temperatura ambiente y sin sol, al menos tres horas, y recién entonces se ensobra con desecante; una tarjeta húmeda embolsada pierde actividad enzimática, en particular la biotinidasa y la galactosa uridiltransferasa. Se envía dentro de las 24 a 48 horas: la demora del correo es el mayor obstáculo del programa. Los datos del recién nacido, la fecha y hora de nacimiento y de la toma, el peso, la prematurez, la nutrición parenteral y las transfusiones se registran en la tarjeta porque cambian la interpretación.

Límite de detección típico

0,5 µU/mL de tirotrofina; 0,2 mg/dL de fenilalanina en el eluato de un disco de 3 mm

Incertidumbre típica

±10 a 15 % relativo; la variabilidad del volumen de sangre por disco y del hematocrito es la fuente principal

Área

Clínico/bioquímico; Química analítica; Biología molecular

Fecha de última actualización: 9/9/2026

Ficha N.º 1516 · ¿Ves algo para corregir? Escribinos