Pesquisa neonatal en gota de sangre seca: hipotiroidismo, fenilcetonuria, fibrosis quística y otras enfermedades congénitas

Fundamento

Entre las 48 horas y el quinto día de vida se punza el talón del bebé y se dejan caer gotas de sangre sobre los círculos de una tarjeta de papel de filtro de calidad controlada, que se seca al aire y se envía al laboratorio de pesquisa. De cada círculo se troquelan discos de 3 mm que contienen un volumen reproducible de sangre y se eluyen. La tirotrofina, la 17-hidroxiprogesterona y la tripsina inmunorreactiva se determinan por inmunoensayo fluorométrico o quimioluminiscente en microplaca; la fenilalanina, por fluorometría o por espectrometría de masas en tándem; la biotinidasa, por un ensayo enzimático colorimétrico; la galactosa total y la galactosa-1-fosfato uridiltransferasa, por métodos enzimáticos y fluorométricos. La espectrometría de masas en tándem con dilución isotópica, a partir de un solo disco, cuantifica en dos minutos decenas de aminoácidos y acilcarnitinas y permite ampliar el panel a los errores congénitos del metabolismo. Los valores se comparan con puntos de corte establecidos por el programa, ajustados por edad al momento de la toma, peso al nacer y prematurez, que se fijan con alta sensibilidad a costa de falsos positivos; toda muestra sobre el punto de corte se repite por duplicado en la misma tarjeta y, si persiste, se cita al bebé para una muestra de suero y el estudio confirmatorio. El programa mide su desempeño por la cobertura, la edad al primer resultado y la tasa de recitación.

Analito (qué se mide)

Tirotrofina, fenilalanina, 17-hidroxiprogesterona, tripsina inmunorreactiva, biotinidasa, galactosa y aminoácidos y acilcarnitinas

Matriz (en qué muestra)

Sangre entera de talón del recién nacido secada en papel de filtro

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Troqueladora de discos de 3 mm; lectores de fluorescencia y de quimioluminiscencia para microplaca; espectrómetro de masas en tándem con cromatografía líquida o con inyección directa; agitadores e incubadoras de microplacas; sistema informático de gestión del programa con seguimiento de cada recién nacido.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Kits de inmunoensayo en gota de sangre seca para cada analito con sus calibradores en matriz de sangre seca; patrones internos deuterados de aminoácidos y acilcarnitinas; controles de calidad en sangre seca de los programas internacionales; solventes de grado espectrometría de masas.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Tarjetas de papel de filtro de grado pesquisa (S&S 903 o equivalente) con datos del recién nacido; lancetas de talón; microplacas; puntas con filtro; sobres y bolsas con desecante para el envío.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Tarjetas; kits; patrones; controles; microplacas.

Unidad

kg/m3 · µU/mL de tirotrofina · mg/dL de fenilalanina · ng/mL de 17-hidroxiprogesterona y de tripsina inmunorreactiva · µmol/L de aminoácidos y acilcarnitinas

Rango de referencia

Puntos de corte del orden de 10 µU/mL para tirotrofina, 2 a 2,5 mg/dL para fenilalanina y 60 a 70 ng/mL para tripsina inmunorreactiva, ajustados por cada programa; la incidencia conjunta de las enfermedades pesquisadas es de alrededor de 1 en 1.300 nacimientos

Norma que lo exige

Ley 23.413 y sus ampliatorias 23.874 y 24.438, que obligan a la pesquisa de fenilcetonuria, hipotiroidismo congénito, fibrosis quística, galactosemia, hiperplasia suprarrenal congénita y deficiencia de biotinidasa en todos los recién nacidos; Ley 26.279, que establece el régimen de detección y tratamiento de las patologías del recién nacido y su cobertura obligatoria; las normas del Programa Nacional de Fortalecimiento de la Detección Precoz de Enfermedades Congénitas del Ministerio de Salud; los programas provincialesnorma internacional

Norma que describe la técnica

Las guías del Programa Nacional del Ministerio de Salud para la pesquisa neonatal; CLSI NBS01 para la toma y el manejo de las muestras de sangre en papel de filtro; CLSI NBS04 para el uso de espectrometría de masas en tándem en pesquisa neonatal; las recomendaciones de la Sociedad Internacional de Pesquisa Neonatal; ISO 15189norma internacional

Edición y vigencia de la norma

CLSI NBS01, 7.ª edición (2021); CLSI NBS04, 2.ª edición (2017)

Volumen de muestra

Una tarjeta con los círculos llenos por completo, del orden de 4 a 5 gotas de sangre de talón, tomada entre las 48 horas y el quinto día de vida

Conservación y transporte

La calidad de la gota manda: un círculo con sangre aplicada en dos capas, una gota que no traspasó el papel o una tarjeta puesta a secar apoyada sobre una superficie da resultados falsos y hay que repetir la punción. Se seca en posición horizontal al aire, a temperatura ambiente y sin sol, al menos tres horas, y recién entonces se ensobra con desecante; una tarjeta húmeda embolsada pierde actividad enzimática, en particular la biotinidasa y la galactosa uridiltransferasa. Se envía dentro de las 24 a 48 horas: la demora del correo es el mayor obstáculo del programa. Los datos del recién nacido, la fecha y hora de nacimiento y de la toma, el peso, la prematurez, la nutrición parenteral y las transfusiones se registran en la tarjeta porque cambian la interpretación.

Límite de detección típico

0,5 µU/mL de tirotrofina; 0,2 mg/dL de fenilalanina en el eluato de un disco de 3 mm

Incertidumbre típica

±10 a 15 % relativo; la variabilidad del volumen de sangre por disco y del hematocrito es la fuente principal

Área

Clínico/bioquímico; Química analítica; Biología molecular

Fecha de última actualización: 9/9/2026