Proteinograma electroforético e inmunofijación en suero y orina

Fundamento

En la electroforesis de zona, el suero se siembra en una tira de acetato de celulosa o en un gel de agarosa, o se inyecta en un capilar, y se aplica un campo eléctrico en un tampón alcalino donde todas las proteínas están cargadas negativamente y migran hacia el ánodo a velocidades que dependen de su carga y su tamaño: la albúmina, la más rápida, se separa de las alfa 1, alfa 2, beta y gamma globulinas. Las bandas se tiñen y se cuantifican por densitometría, o se detectan directamente por absorbancia a 200 nanómetros en la electroforesis capilar, y se informa el porcentaje y la concentración de cada fracción, calculada con las proteínas totales. Un pico estrecho y alto en la zona gamma o beta indica un componente monoclonal, que se cuantifica midiendo el área del pico. La inmunofijación identifica de qué inmunoglobulina se trata: se corren seis carriles idénticos de la muestra y sobre cada uno se aplica un antisuero específico contra las cadenas pesadas G, A y M y las livianas kappa y lambda, que precipitan e inmovilizan solo a la proteína correspondiente; al lavar y teñir queda una banda en el carril del isotipo del componente, por ejemplo IgG kappa. En orina, la muestra de 24 horas se concentra cincuenta a cien veces antes de correrla, para detectar las cadenas livianas libres (proteína de Bence Jones), que el sedimento y las tiras reactivas no ven. El estudio se completa con la cuantificación de inmunoglobulinas y de cadenas livianas libres en suero por nefelometría.

Analito (qué se mide)

Albúmina, alfa 1, alfa 2, beta y gamma globulinas, y componente monoclonal con su isotipo

Matriz (en qué muestra)

Suero; orina de 24 horas concentrada; líquido cefalorraquídeo

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Equipo de electroforesis en gel de agarosa con fuente de poder, cámara y densitómetro, o sistema de electroforesis capilar automatizado; estufa de secado y teñido; concentradores de orina por centrifugación o por membrana; nefelómetro o turbidímetro para inmunoglobulinas y cadenas livianas libres.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Geles de agarosa o capilares y tampones del sistema; colorantes (negro amido, violeta ácido); antisueros monoespecíficos anti IgG, IgA, IgM, kappa y lambda; controles normales y con componente monoclonal; reactivos de nefelometría.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Aplicadores de muestra; papeles de secado; cubetas; concentradores; tubos.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Geles y capilares; antisueros; colorantes; controles.

Unidad

kg/m3 · g/dL y g/L por fracción · % de cada fracción · g/L de componente monoclonal · mg/24 h de cadenas livianas en orina

Rango de referencia

Valores de referencia en suero: albúmina de 3,5 a 5 g/dL (55 a 65 %), gamma globulinas de 0,7 a 1,6 g/dL (11 a 21 %); un componente monoclonal mayor a 3 g/dL en suero o a 500 mg en 24 horas en orina es uno de los criterios de mieloma

Norma que lo exige

Las guías de diagnóstico y seguimiento de gammapatías monoclonales de las sociedades de hematología, que exigen proteinograma, inmunofijación y cadenas livianas libres para el diagnóstico y los criterios de respuesta; las obras sociales y el sistema de cobertura de medicamentos de alto costo, que piden el componente monoclonal cuantificado para autorizar el tratamiento del mieloma; los laboratorios se habilitan según la Ley 17.132; ISO 15189norma internacional

Norma que describe la técnica

Las recomendaciones del International Myeloma Working Group para el diagnóstico y la evaluación de respuesta; CLSI documento sobre electroforesis de proteínas séricas; las guías de la Asociación Internacional de Química Clínica sobre la medición del componente monoclonal; los insertos de los sistemas comerciales de electroforesis capilar y en agarosanorma internacional

Edición y vigencia de la norma

Criterios del International Myeloma Working Group (2014, con actualizaciones); ISO 15189:2022

Volumen de muestra

1 mL de suero; para orina, la recolección completa de 24 horas con el volumen registrado, de la que se concentra una alícuota

Conservación y transporte

El suero se separa del coágulo y se conserva refrigerado hasta una semana o congelado; una muestra hemolizada agrega hemoglobina en la zona beta y una muestra vieja muestra bandas de fibrinógeno que se confunden con un monoclonal, y por eso se usa suero y no plasma. La orina de 24 horas se recolecta completa, sin conservante o con el que indique el laboratorio, y se informa el volumen; sin el volumen no se puede calcular la excreción diaria. Un componente monoclonal chico puede quedar tapado por una gamma policlonal alta, y por eso la inmunofijación se hace aunque el proteinograma parezca normal cuando la sospecha clínica es fuerte.

Límite de detección típico

0,1 a 0,2 g/L de componente monoclonal por electroforesis; 10 a 20 mg/L por inmunofijación

Incertidumbre típica

±5 a 10 % en la cuantificación de fracciones; el componente monoclonal chico tiene mayor variabilidad y por eso el seguimiento se hace siempre con el mismo método

Área

Clínico/bioquímico; Química analítica

Fecha de última actualización: 9/9/2026