Recuento de bacterias heterótrofas en placa (HPC) en agua potable

Fundamento

Se siembra un volumen conocido de muestra en agar para recuento en placa, por incorporación en el medio fundido o por extensión en superficie, y se incuba 24 horas a 37 °C o 48 a 72 horas a 22 °C según el objetivo. Cada bacteria viable capaz de crecer en ese medio da una colonia visible; el recuento se expresa por mililitro. La incubación a 22 °C detecta la flora ambiental del agua y la de 37 °C, la de origen humano o animal.

Analito (qué se mide)

Bacterias heterótrofas viables

Matriz (en qué muestra)

Agua potable de red y envasada; agua tratada

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Estufas de cultivo a 22 °C y a 37 °C; baño termostático a 45 °C para mantener el agar fundido; contador de colonias; cabina de seguridad biológica o mechero.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Agar para recuento en placa (PCA) o agar de extracto de levadura; agua de dilución con buffer de fosfato; tiosulfato de sodio para muestras cloradas.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Placas de Petri estériles; pipetas estériles; tubos de dilución.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios de cultivo; placas; pipetas descartables.

Unidad

UFC/mL · UFC/100 mL en aguas de muy baja carga

Rango de referencia

Límite del artículo 982: 500 UFC/mL a 37 °C. Un agua de red bien clorada suele estar por debajo de 10 UFC/mL

Norma que lo exige

Código Alimentario Argentino, artículo 982 (agua potable de suministro público y de uso domiciliario), que exige una bacteria mesófila máxima de 500 UFC/mL; Código Alimentario Argentino, artículos 983 a 985 (aguas envasadas y minerales)argentina e internacional

Norma que describe la técnica

APHA Standard Methods 9215 B; ISO 6222; ISO 8199 para los principios generales del recuentoargentina e internacional

Edición y vigencia de la norma

ISO 6222:1999, vigente; APHA Standard Methods 24ª edición (2023)

Volumen de muestra

100 a 250 mL en frasco estéril con tiosulfato de sodio

Conservación y transporte

El frasco tiene que traer tiosulfato para neutralizar el cloro apenas se toma la muestra: sin él, el cloro sigue matando bacterias dentro del frasco durante el viaje y el recuento sale falsamente bajo. Se refrigera a 4 °C y se siembra dentro de las 24 horas, idealmente antes de las 8. La canilla se desinfecta y se deja correr el agua un par de minutos antes de llenar, para muestrear la red y no el grifo.

Límite de detección típico

1 UFC/mL con siembra directa; 1 UFC/100 mL por filtración por membrana

Incertidumbre típica

Los recuentos siguen una distribución de Poisson: se informan con su intervalo de confianza y la placa útil es la que tiene entre 30 y 300 colonias

Área

Aguas; Microbiología; Alimentos y bebidas

Fecha de última actualización: 8/9/2026