Tiempo de retención en HPLC

Fundamento

El analito se reparte entre la fase móvil y la estacionaria; el tiempo que tarda en eluir desde la inyección hasta el máximo del pico es característico del compuesto en condiciones fijas de columna, fase móvil, caudal y temperatura.

Matriz (en qué muestra)

Extracto o solución inyectada

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafo líquido (HPLC/UHPLC) con bomba, inyector y detector; software de adquisición.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Solventes grado HPLC; buffers; patrones de identificación.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Material volumétrico; filtros de fase móvil.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Viales; septos; filtros de jeringa 0,22-0,45 µm; columna.

Unidad

s · min · s

Rango de referencia

Repetibilidad de tR típica ≤1 % RSD; se controla con el tiempo de retención relativo

Norma que lo exige

Farmacopeas y normas del producto analizadonorma internacional

Norma que describe la técnica

USP <621> Chromatography; Ph. Eur. 2.2.29norma internacional

Edición y vigencia de la norma

USP-NF se publica todos los años y la Farmacopea Europea va por su 11ª edición con suplementos periódicos. Los capítulos generales cambian de contenido entre ediciones aunque conserven el número, así que la edición usada tiene que constar en el informe.

Volumen de muestra

1 a 100 µL de inyección, de un vial de 1 a 2 mL

Conservación y transporte

Vial de vidrio ámbar con septum, refrigerado a 4 °C. Los extractos se guardan congelados. El tiempo de retención solo es comparable si la columna, la fase móvil y el caudal son los mismos: por eso se informa siempre junto con las condiciones cromatográficas.

Límite de detección típico

0,01 minuto de resolución

Incertidumbre típica

±1 a 2% en el tiempo de retención relativo; el absoluto deriva con la columna y la temperatura

Área

Química analítica; Farmacéutico

Fecha de última actualización: 3/9/2026