Colinesterasa eritrocitaria por método cinético de Ellman

Fundamento

La enzima hidroliza la acetiltiocolina y el producto reacciona con el DTNB dando un color amarillo que se sigue en continuo: la pendiente es la actividad. Es una medición cinética, de modo que la temperatura tiene que estar controlada en 37 grados durante toda la lectura. En el glóbulo rojo la enzima es la misma que la del tejido nervioso, de modo que su inhibición refleja lo que pasa en el sistema nervioso mejor que la plasmática. El resultado se compara con el valor basal del propio trabajador, tomado antes de la temporada de exposición: la variación entre personas es tan grande que un valor aislado, aunque esté dentro del rango de referencia, puede significar una inhibición importante.

Analito (qué se busca)

Colinesterasa eritrocitaria

Matriz (en qué muestra)

Sangre

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Espectrofotómetro con lectura cinética termostatizada a 37 °C; centrífuga; micropipetas.

Proveedores de Micropipetas y puntas · Espectrofotometría UV-Vis · Centrífugas.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Acetiltiocolina; DTNB; buffer fosfato de pH 7,4; reactivos de lisis; controles de dos niveles.

Proveedores de Reactivos y solventes.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Cubetas; tubos con heparina; planilla con el valor basal del trabajador y la fecha de la última exposición.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Cubetas; puntas.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Unidad

kat · % respecto del valor basal individual · U/L

Rango de referencia

Se compara con el basal del trabajador; se recupera lentamente, al ritmo de renovación de los glóbulos rojos

Norma que lo exige

ISO 15189, que fija los requisitos de calidad y competencia de los laboratorios clínicos y es el marco bajo el cual se realiza esta determinación. La norma no describe el método: cada laboratorio lo valida según el equipo y el reactivo que usa, y sigue las instrucciones de uso del fabricante.norma internacional

Edición y vigencia de la norma

Esta técnica no responde a una norma única: se aplica con procedimientos internos validados por cada laboratorio, o forma parte de un método más amplio que sí tiene norma. Si el resultado va a usarse con fines regulatorios o legales, hay que acordar de antemano el procedimiento y su validación.

Volumen de muestra

3 a 5 mL de sangre con heparina, o suero

Conservación y transporte

Refrigerar a 4 °C y analizar dentro de las 48 horas, o congelar a −20 °C. Conviene tener un valor basal del trabajador antes de la exposición: la actividad varía mucho entre personas.

Límite de detección típico

100 U/L de actividad

Incertidumbre típica

±10 a 15%; lo que importa es la caída respecto del basal, no el valor absoluto

Área

Toxicología; Higiene y seguridad

Fecha de última actualización: 1/10/2026

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