Detección de eritropoyetina, hormona de crecimiento y otras hormonas peptídicas prohibidas

Fundamento

Cada hormona exige su estrategia. La eritropoyetina recombinante y sus análogos de acción prolongada se distinguen de la endógena por su patrón de glicosilación, que les da distinta carga: la muestra se concentra y se somete a isoelectroenfoque o a electroforesis en gel en condiciones desnaturalizantes o nativas, y las bandas se revelan por inmunotransferencia con anticuerpos específicos y quimioluminiscencia; el patrón de bandas de la recombinante es distinguible del de la endógena, y el análisis lo interpretan expertos con criterios definidos. La hormona de crecimiento se detecta por dos vías complementarias: la de isoformas, que aprovecha que la hipófisis secreta varias formas moleculares mientras la recombinante es una sola, y mide la relación entre ellas con inmunoensayos específicos, con una ventana de detección de un día; y la de biomarcadores, que mide en suero dos sustancias que la hormona induce, el factor de crecimiento similar a la insulina tipo uno y el propéptido del procolágeno tipo tres, y los combina en una fórmula que da una ventana de hasta dos semanas. La gonadotrofina coriónica, prohibida en varones, se mide por inmunoensayo y se confirma por espectrometría de masas. Las insulinas sintéticas se detectan por espectrometría de masas de alta resolución tras inmunopurificación, distinguiéndolas de la humana por las modificaciones de su secuencia. Toda detección positiva se confirma con un método independiente.

Analito (qué se busca)

Eritropoyetina y sus análogos; Hormona de crecimiento; Gonadotrofina coriónica; Insulinas y sus marcadores

Matriz (en qué muestra)

Orina y suero de deportistas; muestras de sangre tomadas con el protocolo antidopaje; muestras seriadas del pasaporte

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Equipos de isoelectroenfoque y de electroforesis con transferencia; sistema de detección por quimioluminiscencia con cámara; analizadores de inmunoensayo; cromatógrafo líquido acoplado a espectrometría de masas de alta resolución; equipos de inmunopurificación; centrífuga refrigerada; freezer de menos 80 grados.

Proveedores de Centrífugas · Biología molecular · Cromatografía líquida (HPLC/UPLC).

Reactivos¿Dónde lo compro?

Anticuerpos monoclonales específicos; patrones de eritropoyetina recombinante y de sus análogos; kits de inmunoensayo de isoformas y de biomarcadores; reactivos de electroforesis y de transferencia; patrones de insulinas.

Proveedores de Reactivos y solventes · Biología molecular.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Geles y membranas; tubos de suero y de orina; concentradores; puntas y viales de bajo enlace.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Anticuerpos; kits; geles; membranas.

Unidad

1 · patrón de bandas y su posición relativa · relación entre isoformas · valores de los biomarcadores combinados en la fórmula de decisión · ng/mL de las hormonas medidas · 1

Rango de referencia

Los criterios de decisión están definidos en los documentos técnicos por cada método; la ventana de detección va de horas para la hormona de crecimiento por isoformas a días o semanas según el método y la sustancia

Norma que lo exige

El Código Mundial Antidopaje y el Estándar Internacional para Laboratorios, con los documentos técnicos específicos sobre eritropoyetina y sobre hormona de crecimiento, que fijan los criterios de identificación y de informe; Ley 26.912; los reglamentos de las federaciones internacionales

Norma que describe la técnica

Los documentos técnicos de la Agencia Mundial Antidopaje sobre el análisis de eritropoyetina y análogos, que definen los criterios de aceptación de las imágenes y de las bandas, y sobre los métodos de isoformas y de biomarcadores de la hormona de crecimiento; el Estándar Internacional para Laboratorios; las publicaciones de referencia de los métodos

Edición y vigencia de la norma

Documentos técnicos de la AMA sobre eritropoyetina y hormona de crecimiento, ediciones vigentes

Volumen de muestra

Orina de la muestra estándar y tubos de suero tomados con el protocolo de sangre del control antidopaje

Conservación y transporte

Estas moléculas son frágiles y la preanalítica define el resultado: las muestras de sangre se separan y se congelan según el protocolo y se transportan en cadena de frío documentada, porque una muestra que llegó tibia no se puede analizar. La orina para eritropoyetina se conserva congelada. Los métodos de imagen se interpretan con criterios estrictos y por analistas entrenados, y las imágenes forman parte del expediente y se conservan. La ventana de detección de cada método se explicita al informar, porque un negativo solo significa que no se detectó en esa ventana.

Límite de detección típico

Del orden de picogramos por mililitro para la eritropoyetina tras concentración; los métodos de hormona de crecimiento tienen límites definidos en sus documentos técnicos

Incertidumbre típica

Los métodos de identificación se evalúan por el cumplimiento de los criterios de los documentos técnicos; los cuantitativos con incertidumbres del 15 al 25 %

Área

Toxicología; Biología molecular; Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 10/9/2026

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