Ensayo de Ames (mutación reversa en Salmonella typhimurium)

Fundamento

Se usan cepas de Salmonella incapaces de sintetizar histidina; si la sustancia es mutagénica, revierte la mutación y las bacterias recuperan la capacidad de crecer en medio sin histidina. El ensayo se hace con y sin fracción microsomal hepática para simular la activación metabólica.

Matriz (en qué muestra)

Sustancia química / extracto ambiental

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Estufa 37 °C; campana de bioseguridad; baño 45 °C; contador de colonias; freezer -80 °C.

Proveedores de Estufas, muflas y hornos.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Cepas TA98, TA100, TA1535, TA1537; fracción S9 de hígado de rata inducido; cofactores NADP y glucosa-6-fosfato; agar de superficie con histidina y biotina; mutágenos de referencia.

Proveedores de Cultivo y microbiología.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Placas; tubos; pipetas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Placas; puntas; cepas.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Unidad

1 · Revertantes por placa · Índice de mutagenicidad (relación tratado/control)

Rango de referencia

Positivo: duplicación de revertantes con relación dosis-respuesta

Norma que describe la técnica

OCDE 471

Edición y vigencia de la norma

Guías de ensayo de la OCDE, de revisión periódica por número. Son las que aceptan las autoridades regulatorias de la mayoría de los países para ensayos de toxicidad; se descargan sin cargo del sitio de la OCDE, que marca cuáles fueron reemplazadas.

Volumen de muestra

1 a 5 mg de sustancia pura, o el extracto equivalente

Conservación y transporte

Vial de vidrio ámbar a −20 °C, protegido de la luz. Las cepas de Salmonella se conservan congeladas y se verifican antes de cada ensayo.

Límite de detección típico

Detecta un aumento de 2 veces sobre las revertantes espontáneas

Incertidumbre típica

±20 a 30%: se corre por triplicado y con y sin activación metabólica

Área

Toxicología

Fecha de última actualización: 3/9/2026

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