Perfil esteroideo urinario y determinación del origen exógeno de la testosterona por espectrometría de masas de relación isotópica

Fundamento

El perfil esteroideo mide por cromatografía gaseosa acoplada a espectrometría de masas un conjunto de esteroides endógenos y sus metabolitos en la orina, entre ellos la testosterona, la epitestosterona, la androsterona, la etiocolanolona y los dioles, y calcula las relaciones entre ellos, en particular la relación entre testosterona y epitestosterona, que en una persona es notablemente estable y que la administración de testosterona altera porque sube una y no la otra. Los valores se corrigen por densidad y se cargan en el pasaporte biológico del atleta, donde un modelo estadístico bayesiano calcula los límites individuales esperados a partir de sus propias mediciones anteriores en lugar de usar valores poblacionales: cuando un valor cae fuera de esos límites, el perfil se marca como atípico y dispara el análisis confirmatorio, aunque la sustancia sea endógena. Ese confirmatorio es la espectrometría de masas de relación isotópica de carbono: la testosterona farmacéutica se sintetiza a partir de precursores vegetales cuya relación entre carbono 13 y carbono 12 es distinta de la de los esteroides que el cuerpo produce a partir del colesterol de la dieta, de modo que se aíslan por cromatografía los metabolitos de interés y un compuesto endógeno de referencia, se los quema y se compara su relación isotópica: una diferencia significativa entre el metabolito y la referencia prueba origen exógeno. La técnica exige purificación exhaustiva, porque cualquier coeluyente altera la relación medida.

Matriz (en qué muestra)

Orina de deportistas; muestras seriadas del pasaporte biológico; muestras con perfil esteroideo alterado

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Cromatógrafo gaseoso acoplado a espectrometría de masas para el perfil; sistema de cromatografía líquida preparativa para la purificación; cromatógrafo gaseoso acoplado a espectrómetro de masas de relación isotópica con interfaz de combustión; sistemas de extracción y de derivatización; freezer.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Patrones certificados de los esteroides y patrones internos; enzima de hidrólisis; reactivos de derivatización; materiales de referencia isotópica certificados; solventes de alta pureza.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Cartuchos y columnas de purificación; viales; material descartable.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Patrones; solventes; columnas; gases de alta pureza.

Unidad

1 · relación testosterona sobre epitestosterona adimensional · concentraciones de cada esteroide en ng/mL · diferencia de relación isotópica en por mil entre metabolito y referencia

Rango de referencia

La relación entre testosterona y epitestosterona en la mayoría de las personas está por debajo de 1 y un valor por encima de 4 dispara el confirmatorio; una diferencia isotópica de tres por mil o más entre el metabolito y el compuesto de referencia se considera prueba de origen exógeno

Norma que lo exige

El Código Mundial Antidopaje y el Estándar Internacional para Laboratorios, con los documentos técnicos específicos sobre el módulo esteroideo del pasaporte biológico y sobre el análisis de relación isotópica; Ley 26.912 y la normativa nacional antidopaje; los reglamentos de las federaciones internacionales sobre el pasaporte

Norma que describe la técnica

Los documentos técnicos de la Agencia Mundial Antidopaje sobre el perfil esteroideo endógeno, sobre el pasaporte biológico del atleta y sobre los criterios del análisis por relación isotópica de carbono; el Estándar Internacional para Laboratorios; las publicaciones metodológicas de referencia sobre purificación previa a la medición isotópica

Edición y vigencia de la norma

Documentos técnicos de la AMA sobre perfil esteroideo y relación isotópica, ediciones vigentes

Volumen de muestra

El volumen de la muestra estándar; la relación isotópica consume una fracción importante porque exige purificación

Conservación y transporte

El perfil se interpreta contra el propio historial del atleta y no contra valores poblacionales, y por eso el valor del pasaporte crece con el número de muestras: un perfil aislado dice poco. Factores como el alcohol, algunos medicamentos, el embarazo y ciertas variantes genéticas de una enzima que conjuga los esteroides alteran las relaciones y se tienen en cuenta en la interpretación, que hacen expertos designados. La purificación previa al análisis isotópico es el paso crítico y su calidad se verifica, ya que una impureza que coeluye desplaza la relación y podría producir un resultado adverso equivocado.

Límite de detección típico

0,5 a 2 ng/mL para los esteroides del perfil; el análisis isotópico exige concentraciones suficientes para purificar

Incertidumbre típica

±0,5 por mil en las relaciones isotópicas; el modelo del pasaporte expresa los límites individuales con probabilidades definidas

Área

Toxicología; Química analítica; Clínico/bioquímico

Fecha de última actualización: 10/9/2026