Actividad de colinesterasa por método cinético de Ellman

Fundamento

La colinesterasa hidroliza la acetiltiocolina liberando tiocolina, que reacciona con el reactivo de Ellman (DTNB) generando un anión amarillo. La velocidad de aparición de color a 405 nm es proporcional a la actividad enzimática, que cae cuando hay inhibición por el plaguicida.

Analito (qué se mide)

Colinesterasa plasmática y eritrocitaria

Matriz (en qué muestra)

Sangre

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Espectrofotómetro con lectura cinética termostatizada a 37 °C; centrífuga.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Acetiltiocolina; DTNB (ácido ditiobisnitrobenzoico); buffer fosfato pH 7,4; controles.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Cubetas; tubos con heparina; micropipetas.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Cubetas; puntas.

Unidad

U/L · % respecto del valor basal individual

Rango de referencia

Se investiga descenso >25% respecto del basal preocupacional

Edición y vigencia de la norma

Esta técnica no responde a una norma única: se aplica con procedimientos internos validados por cada laboratorio, o forma parte de un método más amplio que sí tiene norma. Si el resultado va a usarse con fines regulatorios o legales, hay que acordar de antemano el procedimiento y su validación.

Volumen de muestra

3 a 5 mL de sangre con heparina, o suero

Conservación y transporte

Refrigerar a 4 °C y analizar dentro de las 48 horas, o congelar a −20 °C. Conviene tener un valor basal del trabajador antes de la exposición: la actividad varía mucho entre personas.

Límite de detección típico

100 U/L de actividad

Incertidumbre típica

±10 a 15%; lo que importa es la caída respecto del basal, no el valor absoluto

Área

Toxicología; Higiene y seguridad

Fecha de última actualización: 3/9/2026