Diagnóstico de loque americana y de loque europea por examen de campo, cultivo e identificación molecular

Fundamento

El examen de campo empieza por el cuadro de cría: la loque americana produce opérculos hundidos, húmedos y perforados, y las larvas muertas se transforman en una masa parda que se estira en un hilo al introducir un palillo, prueba sencilla y muy indicativa; al secarse dejan una escama fuertemente adherida a la celda. La loque europea afecta larvas más jóvenes, que mueren retorcidas y con un olor distinto, y su masa no filamenta. La confirmación se hace en el laboratorio: cultivo en medios selectivos a partir de escamas, larvas o miel, con identificación por características morfológicas y bioquímicas, y confirmación por reacción en cadena de la polimerasa específica, que además permite genotipificar el agente de la loque americana, información útil para rastrear el origen de un brote. La detección de esporas en miel y en cera permite conocer el nivel de contaminación de un apiario y evaluar colmenas sin síntomas, que son las que diseminan la enfermedad; el resultado se expresa como esporas por gramo. Los equipos de campo con tiras inmunocromatográficas dan un resultado rápido y son muy útiles para decidir en el momento, con la limitación de su menor sensibilidad frente a cargas bajas.

Analito (qué se mide)

Paenibacillus larvae y Melissococcus plutonius en cría, en miel y en abejas

Matriz (en qué muestra)

Cría con síntomas de enfermedad; escamas de larvas muertas; miel y cera de las colmenas; abejas adultas; material apícola de segunda mano en evaluación

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Estufa de cultivo y campana de flujo laminar; microscopio; equipo de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real; centrífuga; homogeneizador; equipo de siembra; tiras inmunocromatográficas de campo.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Medios selectivos de cultivo; reactivos de extracción de ácidos nucleicos; cebadores y sondas específicos; controles positivos y negativos; colorantes de tinción.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Placas y tubos; hisopos y palillos; frascos de muestreo; equipo de protección; material de embalaje para envío de muestras.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Medios y reactivos; placas; tiras; guantes.

Unidad

1 · resultado del examen de campo y de la prueba del hilo · aislamiento e identificación del agente · resultado de la reacción en cadena de la polimerasa · esporas por gramo en miel o en cera · genotipo del aislamiento cuando corresponde

Rango de referencia

La detección de esporas en miel de colmenas sin síntomas indica presencia del agente en el apiario y anticipa el brote clínico; los niveles altos de esporas se asocian a colmenas con enfermedad activa aunque todavía no se vean síntomas

Norma que lo exige

Las normas del organismo nacional de sanidad animal, que declaran a la loque americana enfermedad de notificación obligatoria y establecen las medidas sanitarias, incluidas la interdicción del apiario y la destrucción del material afectado; los programas provinciales de sanidad apícola; los requisitos sanitarios para el movimiento de colmenas y de material apícola; las condiciones de exportación de productos de la colmena

Norma que describe la técnica

Los manuales de la organización mundial de sanidad animal sobre diagnóstico de loque americana y europea; las guías internacionales normalizadas de métodos de investigación en abejas; los protocolos del laboratorio de referencia nacional; las guías del organismo de sanidad animal sobre toma y envío de muestras

Edición y vigencia de la norma

Normas del organismo nacional de sanidad animal sobre loque americana vigentes

Volumen de muestra

Destructivo para la muestra. Un trozo de panal con celdas afectadas o una muestra de miel de decenas de gramos

Conservación y transporte

El trozo de panal se envía en papel, nunca en bolsa plástica cerrada, porque la humedad favorece los hongos que arruinan la muestra y dificultan el aislamiento. Las muestras se identifican por colmena y por apiario, con la ubicación exacta, ya que el diagnóstico dispara medidas sanitarias sobre un área. El material sospechoso se manipula con precaución y no se traslada entre apiarios, dado que las esporas se transportan con enorme facilidad en herramientas, guantes y ropa. Ante confirmación se aplica el protocolo sanitario sin demora.

Límite de detección típico

El cultivo y la reacción en cadena de la polimerasa detectan cargas bajas de esporas en miel; las tiras de campo requieren cargas más altas

Incertidumbre típica

El recuento de esporas tiene incertidumbre alta y se informa por órdenes de magnitud; la identificación es cualitativa

Área

Veterinaria; Microbiología; Biología molecular

Fecha de última actualización: 10/9/2026