Diagnóstico de nosemosis: recuento de esporas en cámara y diferenciación de especies por reacción en cadena de la polimerasa

Fundamento

El diagnóstico clásico es el recuento en cámara: se toma una muestra de unas sesenta abejas adultas, se separan los abdómenes, se maceran en un volumen definido de agua, y una alícuota de la suspensión se carga en una cámara de recuento de glóbulos, donde las esporas se observan al microscopio con contraste de fases como cuerpos ovalados y refringentes; con el número contado y el factor de la cámara se calcula el número de esporas por abeja. El muestreo importa: las pecoreadoras que se toman en la piquera son las que tienen mayor carga, y una muestra de abejas jóvenes tomadas del centro del nido subestima el problema. Las dos especies que afectan a la abeja melífera no se distinguen de manera confiable por la morfología de sus esporas, y como su epidemiología y su estacionalidad son distintas —una asociada al invierno y a las diarreas y la otra presente todo el año y hoy dominante en muchas regiones— la diferenciación se hace por reacción en cadena de la polimerasa con cebadores específicos, en formato convencional o en tiempo real, que además permite cuantificar. La interpretación se hace junto con el estado de la colmena, ya que existen infecciones con carga alta y colonias que se sostienen, sobre todo con buena disponibilidad de alimento.

Analito (qué se mide)

Esporas de Nosema apis y de Nosema ceranae en abejas adultas

Matriz (en qué muestra)

Abejas adultas pecoreadoras tomadas en la piquera; abejas muertas frente a la colmena; colmenas con despoblamiento y con diarreas; muestras de monitoreo estacional; abejas de invernada

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Microscopio con contraste de fases; cámara de recuento de glóbulos; homogeneizador o mortero; centrífuga; equipo de reacción en cadena de la polimerasa; micropipetas; balanza.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Agua destilada; reactivos de extracción de ácidos nucleicos; cebadores específicos de cada especie; controles positivos; colorantes de contraste.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Morteros y tubos; portaobjetos y cubreobjetos de cámara; frascos de muestreo; pinzas; congelador para las muestras.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Reactivos; tubos y puntas; abejas de la muestra.

Unidad

kg/kg · esporas por abeja · porcentaje de abejas parasitadas cuando se analizan individualmente · especie identificada · carga relativa por reacción en cadena de la polimerasa · origen y momento del muestreo

Rango de referencia

Los recuentos se expresan en millones de esporas por abeja, y los umbrales de intervención propuestos se ubican en ese orden, aunque la relación entre carga y daño no es lineal y depende mucho del estado nutricional de la colonia

Norma que lo exige

Las normas del organismo nacional de sanidad animal sobre sanidad apícola y sobre las enfermedades bajo vigilancia; los programas provinciales de monitoreo sanitario de apiarios; los requisitos de las certificaciones de buenas prácticas apícolas; las condiciones sanitarias para el movimiento de colmenas y para los servicios de polinización

Norma que describe la técnica

Los manuales de la organización mundial de sanidad animal sobre diagnóstico de nosemosis; las guías internacionales normalizadas de métodos de investigación en abejas, con el procedimiento de recuento y sus factores de conversión; los protocolos moleculares de diferenciación de especies; las guías de los institutos de investigación apícola

Edición y vigencia de la norma

Manuales de la organización mundial de sanidad animal sobre nosemosis vigentes

Volumen de muestra

Destructivo. Unas sesenta abejas por muestra

Conservación y transporte

Las abejas se toman en la piquera o de la tabla de vuelo, no del centro del nido, porque la carga se concentra en las pecoreadoras; ese detalle cambia el resultado por completo. Las muestras se congelan o se conservan en alcohol y se procesan lo antes posible, ya que las esporas se mantienen pero la muestra se degrada y se contamina. Se identifica cada muestra por colmena y por fecha, dado que la carga varía de manera marcada con la estación. El microscopio se enfoca con contraste de fases, sin el cual las esporas se confunden con partículas.

Límite de detección típico

El recuento en cámara detecta cargas desde el orden de decenas de miles de esporas por abeja; la reacción en cadena de la polimerasa es mucho más sensible

Incertidumbre típica

Del orden del 20 al 30 % en el recuento en cámara, dominada por la subdivisión de la muestra y por el recuento

Área

Veterinaria; Microbiología; Producción animal

Fecha de última actualización: 10/9/2026