Diagnóstico del complejo respiratorio bovino por aislamiento, PCR múltiple y serología pareada

Fundamento

El complejo es multicausal: virus que dañan la mucosa y bajan las defensas, entre ellos el herpesvirus bovino tipo 1, el virus sincicial respiratorio bovino, el de la parainfluenza 3, el de la diarrea viral bovina y el coronavirus, y bacterias que colonizan después, sobre todo Mannheimia haemolytica, Pasteurella multocida, Histophilus somni y Mycoplasma bovis. El diagnóstico combina técnicas. La detección de agentes se hace por PCR en tiempo real múltiple sobre hisopados nasofaríngeos profundos o sobre lavado broncoalveolar, que es la muestra de mejor rendimiento en el animal vivo, y permite detectar varios agentes en una sola reacción y en horas. El aislamiento bacteriano en medios enriquecidos sigue siendo necesario porque es lo que permite hacer el antibiograma y determinar la concentración inhibitoria mínima, que es la información que cambia el tratamiento, sobre todo con la resistencia creciente de Mannheimia. Mycoplasma bovis exige medios especiales y crecimiento lento, y por eso en la práctica se detecta por PCR. La serología con sueros pareados, tomados con dos a cuatro semanas de diferencia, muestra por la seroconversión qué agente participó, aunque el resultado llega tarde para tratar y sirve para el diagnóstico del brote y para evaluar la vacunación. En los animales muertos, la necropsia con la descripción de las lesiones, la histopatología y el muestreo de pulmón en la interfaz entre tejido sano y enfermo es lo que da el diagnóstico más firme.

Matriz (en qué muestra)

Hisopados nasofaríngeos y lavados broncoalveolares de bovinos; pulmón y tejidos de necropsia; suero pareado; muestras de feedlot y de crianza

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Termociclador de PCR en tiempo real; cabina de seguridad biológica; estufas y jarras de microaerofilia; equipo de antibiograma por microdilución; microscopio; equipo de histopatología; freezer; heladera portátil para el traslado.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Kits de extracción y paneles de PCR múltiple respiratoria bovina; medios de cultivo enriquecidos y selectivos; paneles de antimicrobianos veterinarios; kits de ELISA para los virus; formol tamponado.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Hisopos nasofaríngeos largos con medio de transporte; equipos de lavado broncoalveolar; tubos sin anticoagulante; frascos de formol; bolsas para tejidos.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Hisopos; kits; medios; paneles de antibiograma.

Unidad

1 · detección positiva o negativa por agente · ciclo umbral · mg/L de concentración inhibitoria mínima · título serológico y seroconversión

Rango de referencia

En un brote suelen detectarse dos o más agentes en la misma muestra; una seroconversión de cuatro veces el título entre sueros pareados se considera significativa

Norma que lo exige

Las resoluciones del SENASA sobre sanidad animal y sobre el uso de antimicrobianos en producción, que exigen prescripción veterinaria y desalientan el uso empírico; el Plan Nacional de Resistencia a los Antimicrobianos; los protocolos sanitarios de los feedlots y de las empresas integradoras; los requisitos de bienestar animal y de trazabilidad de tratamientosnorma argentina

Norma que describe la técnica

El Manual Terrestre de la Organización Mundial de Sanidad Animal para los agentes incluidos; las normas CLSI VET01 y VET08 para el antibiograma veterinario y sus puntos de corte específicos de veterinaria; los protocolos de diagnóstico del INTA y de los laboratorios de la red; las guías de diagnóstico del complejo respiratorio de las sociedades de buiatríanorma argentina

Edición y vigencia de la norma

CLSI VET01, 6.ª edición; Manual Terrestre de la OMSA, edición 2024

Volumen de muestra

Hisopados o lavados de 6 a 10 animales del lote afectado, sin tratar y en fase aguda; sueros pareados de los mismos animales; pulmón de los muertos

Conservación y transporte

Se muestrean animales enfermos y sin antibiótico: un lote ya tratado da cultivos negativos y el antibiograma, que es lo que se busca, no se puede hacer, y ese es el error más frecuente en la práctica. Las muestras van refrigeradas y llegan dentro de las 24 a 48 horas, sin congelar si se busca aislamiento. El pulmón se toma de la zona de transición entre tejido sano y consolidado, no del centro necrótico. Se envían siempre varios animales, porque el resultado de uno solo no representa al lote, y con la historia del corral, las vacunas aplicadas y los tratamientos previos.

Límite de detección típico

10 a 100 copias por reacción en las PCR; el cultivo depende de la carga y del tratamiento previo

Incertidumbre típica

La sensibilidad del aislamiento cae mucho con antibióticos previos; la PCR detecta agentes que también están en animales sanos, por lo que se interpreta con la clínica

Área

Veterinaria; Microbiología; Producción animal

Fecha de última actualización: 10/9/2026