Detección de virus de influenza aviar por RT-PCR en tiempo real

Fundamento

Se extrae el ARN del hisopado y se lo retrotranscribe y amplifica en tiempo real con cebadores y sonda propios del virus, con control interno en cada reacción. Las muestras se toman por lote y no por ave: lo que se vigila es la situación del galpón.

Analito (qué se busca)

Virus de influenza aviar

Matriz (en qué muestra)

Hisopados de aves

Equipamiento necesario¿Dónde lo compro?

Termociclador de tiempo real; cabina de bioseguridad clase II; extractor automático de ácidos nucleicos; centrífuga refrigerada.

Proveedores de Centrífugas · Biología molecular.

Reactivos¿Dónde lo compro?

Kits de extracción de ARN viral; mezcla de RT-qPCR; cebadores y sondas de influenza aviar; controles positivos inactivados.

Material de laboratorio¿Dónde lo compro?

Hisopos con medio de transporte viral; placas ópticas; tubos; registro del lote, el galpón y la fecha de muestreo.

Consumibles¿Dónde lo compro?

Hisopos; puntas con filtro; placas.

Proveedores de Micropipetas y puntas.

Unidad

Ninguna · Detectado/No detectado · Ct

Rango de referencia

El criterio es de ausencia; un positivo se confirma y se tipifica para saber si la cepa es de alta patogenicidad

Norma que lo exige

Programa Nacional de Sanidad Aviar (SENASA)norma argentina

Norma que describe la técnica

Manual de Pruebas de Diagnóstico y Vacunas para los Animales Terrestres de la Organización Mundial de Sanidad Animal (WOAH, ex OIE), capítulos de influenza aviar y de enfermedad de Newcastlenorma argentina

Edición y vigencia de la norma

Resoluciones del SENASA, de actualización permanente. La versión vigente se consulta en el sistema de normativa del organismo, que indica si una resolución fue modificada o derogada.

Volumen de muestra

Hisopados traqueales y cloacales, agrupados de a 5 a 11 aves

Conservación y transporte

Hisopos en medio de transporte viral, refrigerados a 4 °C y procesados dentro de las 48 horas, o congelados a −70 °C. Nunca a −20 °C: esa temperatura degrada más que conservar.

Límite de detección típico

De 10 a 100 copias de genoma por reacción

Incertidumbre típica

Cualitativo con valor de Ct; los positivos se notifican a SENASA

Área

Veterinaria; Biología molecular

Fecha de última actualización: 1/10/2026

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